Rhodol-HBT探针构建及其在Cu2+协同下比色检测UA的研究

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在生命分析中,生物小分子一直是人们检测和分析的关键,这是由于生物小分子参与了生命体的众多生理和病理过程。尿酸(Uric acid,UA)作为生物小分子同样也是如此。尿酸在人体中具有重要作用,因为它是含有嘌呤核苷酸的食物的代谢分解产物,并且它是尿排泄的常规成分。尿酸还可作为人体体液中的抗氧化剂。它溶解在血液中,当人体产生过多的尿酸,不能通过肾脏及时排出,这会增加体液中尿酸的水平,导致下肢和肾脏形成沉淀。血液中的高水平尿酸作为固体晶体沉积在身体部位的关节内,引起炎症和非常痛苦的状态,称为痛风或关节炎。除了这些影响,还会导致肾脏结石或肾衰竭、Lesch-Nyhan综合征、肥胖、糖尿病、高胆固醇和心脏病等。低水平的尿酸还会引起各种疾病,如肝病、范可尼综合征、肾小管紊乱、癌症、帕金森病等。因此,开发化学探针快速检测和准确测定体液中尿酸浓度是一个非常迫切和具有挑战性的研究课题。但目前,电化学技术和医学领域的尿酸酶酶测定的方法,由于抗坏血酸的电位干扰作用和酶的高成本,并且需求经验丰富进行操作,这些技术的弱点使这些方法变得复杂。因此,通过开发使用简单,准确,非酶,可靠的化学探针对尿酸的检测存在巨大需求。由于具有准确的检测能力、高灵敏度和快速响应,化学探针非常适用于监测食品,环境和生物样品中痕量的极毒物质。本文工作就是利用具有“开-关”型的Rhodol-HBT染料,可在荧光(有色)与无荧光(无色)间转换,同时过渡元素已被广泛应用于设计“开-关”型探针的平台。选择的探针团首先与过渡元素离子配位络合,产生荧光猝灭复合物(无色)。检测物在于过渡金属中心的配位或发生各种化学反应都可以恢复荧光(有色)的状态。为我们的研究打下了基础。1.利用Rhodol-HBT染料荧光团,设计了一种Cu2+荧光与颜色“开-关”型探针并最终合成了RHTP。在RHTP的EtOH溶液体系中加入Cu2+后,之前吸收光谱中340 nm处是最大吸收波长,后出现了新的吸收峰565 nm,新的吸收峰的强度是原来的2倍多,溶液由无色变成紫红色,但在荧光光谱中没有出现新的峰,515 nm处的荧光强度减弱了,有荧光很淡。探针选择专一,灵敏,对Cu2+检测限是0.50mM。探针与铜离子有良好比色响应,我们将其成功应用于后面的检测研究。2.在尿酸检测中,结合新合成的探针RHTP,因其有荧光(有颜色)和无荧光(无颜色)的变化。在此基础上,向其乙醇溶液中引入铜离子,形成尿酸检测液(UATS)能够检测尿酸的溶液。在UATS(20m(44)RHTP和20m(44)Cu2+,无水乙醇)的溶液体系中加入UA后,吸收光谱中565 nm处的吸收峰强度不断减弱,原本紫红色溶液变成无色,溶液UATS对UA可以用于快速检测,因其响应时间为4 min,时间较短,同时对UA表现出高选择性和高灵敏性,其检测限为0.06mM。此外,同时成功将其用于血清和尿液的实际样品检测。
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