【摘 要】
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从金针菇子实体浸体中提取的火菇素用Freund完全佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采用血并分离了抗血清,免疫双扩散显示它能与火菇素形成免疫沉淀线,效价为1
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从金针菇子实体浸体中提取的火菇素用Freund完全佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采用血并分离了抗血清,免疫双扩散显示它能与火菇素形成免疫沉淀线,效价为1:16.根据火菇素在血清平板上免疫单向琼脂扩散的结果,建立了不同浓度火菇素免疫反应的标准曲线,可用于火菇素的定量检测.并以该技术对改进前的火菇素提取流程作了定量监测,针对一、二、三等金针菇原料,进行了提取技术改进,可分别使提取率提高71.3%,187.6%和217.9%.研究了火菇素的近紫外和远紫外圆二色性,其水溶液在208nm处表现为大负峰ⅰθⅱ<,208>=6,574degcm<2>·mol<-1>,223nm处为肩,经CCA程度计算分析,火菇素的二级结构组成为:α-螺旋15.2%,平行β-折叠片和β-转角6.1%,反平行β-折叠片32.7%,RND和γ-转角23.4%,-S-S-和芳香22.6%.火菇素二级结构有pH、SDS、乙醇有一定的稳定性,对盐酸胍变性很敏感,热变形可完全破坏其二级结构.火菇素的紫外吸收峰为275nm,εmax=203,22(100cm<2>-mol<-1>),紫外差光谱滴定发现,其平均酪氨酸pK=11.4,酪氨酸残基位于火菇素的疏水内核.碱水解后进行氨基酸组成分析发现火菇素不含色氨酸.火菇素不表现色氨酸荧光而只表现酪氨酸荧光,在激发波长为280nm时最大发射波长为305nm,pH和SDS对酪氨酸疏水微区影响较大,KI几乎不能淬灭火菇素的荧光,Acr是其强淬灭剂.
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