细菌碱性β-1,4-聚糖酶的菌种选育、生物和应用研究

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从碱性土样中分离到数十株产碱性β-1,4-聚糖酶类的细菌,经摇瓶初筛,复筛后,得到一株碱性β-聚糖酶产量较高的碱性细菌.经初步鉴定,属芽孢杆菌属(Bacillus).对酶性质的研究表明:其纤维素酶的最适作用pH为7.6,最适作用温度为60℃;木聚糖酶的最适作用pH为9.0,最适作用温度为55℃,这两种酶具有较好的pH的温度稳定性.对产酶条件进行优化的初步结果表明;该菌的最适生长和产酶pO上8.0,最适产酶温度为28-32p℃,摇床最适转速为150rpm.木聚糖是木聚糖酶的良好的诱导物,山梨糖是纤维素酶的良好诱导物,纤维素粉CF-11和微晶纤维素Avicel不能支持菌体生长和产酶.以麸皮为碳源,产酶的最适浓度为5%.添加尿素和(NH<,4>)SO<,4>为氮源可提高纤维素酶酶活两部,木聚糖酶酶活一倍.添加0.5%的NaCl可进一步提高木聚糖酶活.发酵周期为60小时,在最佳培养条件下,纤维素酶酶活最高可达1.21IUml<-1>,木聚糖酶酶可达443.IU ml<-1>.初步探索了β-1,4-聚糖酶类的调控机制.纤维素酶和木聚糖酶的合成受到诱导.对诱导物的选择,深度和诱导作用时间曲线的研究表明,纤维素酶和木聚糖酶的合成是受不同的因素调控.研究了易代谢碳源如葡萄糖的阻遏作用,葡萄糖对木聚糖酶的阻遏作用比对纤维素酶的阻遏作用强.所产的β-1,4-聚糖酶用于纸浆的漂白和改性实验表明,酶处理纸浆可以提高纸浆强度(裂断长),降低脆性,纸浆的其它性能也得到改善.酶处理麦草浆的条件为:酶用量3IU/g浆,温度20℃
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