【摘 要】
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该研究首先建立对细菌进行定性和定量研究的PCR方法,然后借助此方法研究菊粉在体外培养试验和饲养试验中对猪消化道微生物区系的作用机理.该研究由三个试验组成:(一)用PCR分
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该研究首先建立对细菌进行定性和定量研究的PCR方法,然后借助此方法研究菊粉在体外培养试验和饲养试验中对猪消化道微生物区系的作用机理.该研究由三个试验组成:(一)用PCR分别扩增标准细菌大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌和沙门氏菌的16SrDNA靶序列,扩增产物经1.2﹪琼脂糖凝胶电泳后凝胶成像,根据特异性最强、灵敏度最大的原则筛选它们各自最佳PCR条件,建立定性和定量检测细菌的方法.用此方法对菊粉体外培养试验和饲养试验样品中的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、沙门氏菌和总细菌分别进行定性和定量检测.(二)用0g/L、1g/L、2g/L、4g/L、6g/L、8g/L六个菊粉水平分别体外培养生长猪鲜粪,厌氧培养24h后,测定培养基pH、大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、沙门氏菌和总细菌数量的变化,确定体外培养试验最佳菊粉添加水平,为饲养试验菊粉添加水平提供参考.(三)配制Ⅰ(抗生素)、Ⅱ(0.5﹪菊粉+抗生素)、Ⅲ(1﹪菊粉+抗生素)、Ⅳ(1.5﹪菊粉+抗生素)和Ⅴ(1﹪菊粉)五种日粮.试验分五组,每组三个重复,每个重复6头28龄仔猪,共90头.饲养28天,测定仔猪生长性能指标;饲养试验结束后选择饲喂Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ日粮的试验猪各4头屠宰,测定小肠后段、大肠内容物和粪便中大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、沙门氏菌和总细菌数量变化,测定小肠后段、大肠内容物和粪便pH变化.根据测定结果揭示菊粉对猪肠道微生物区系的作用规律,确定菊粉在猪日粮中最佳添加水平.
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