黄体生成素生物活性测定法及应用研究

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目的:建立黄体生成素(LH)生物活性测定法,通过此法检测和分析机体血清中LH生物活性的变化。方法:以人或SD大鼠血清为样本刺激在体外培养的大鼠睾丸间质细胞产生睾酮(T),通过电化学发光法(ECLI)测定T的水平来间接反应LH的水平,即LH体外生物活性测定法,通过此法检测和分析机体血清中LH生物活性。24只二月龄雄性SD大鼠随机分为安静对照组(C)、中等强度运动组(ME,28m/min)和大强度运动组(HE,35m/min),运动组在实验动物跑台运动,各自训练8周,每周6次,每次全速40分钟。8周后取血,分离血清。随机收集21名体检的健康成年男性血清,按年龄分为老年组(61~74岁)、青年组(19-37岁)。人或大鼠血清样本刺激体外培养的睾丸间质细胞产生T,间接反应血清中LH生物活性的变化。结果:1)大鼠睾丸间质细胞经培养4小时后,所测得睾酮的量达到最大值,表明选择培养4h最合适;2)不同浓度梯度的人血清、SD大鼠血清刺激睾丸间质细胞分泌T所得出的剂量反应曲线有相互平行的趋势,且梯度明显,说明睾丸间质细胞受外源性LH刺激反应良好,LH体外生物活性测定法可以检测血清中具有生物活性的LH变化;3)与C组相比,ME组和HE组大鼠血清刺激睾丸间质细胞产生T的量明显减少(p<0.01),反应LH生物活性下降;ME组与HE组之间血清LH的生物活性无明显差异(p>0.05);4)与青年男性相比,老年男性血清刺激睾丸间质细胞产生T的量明显减少(p<0.01),反应LH生物活性下降。结论:已经建立LH生物活性测定法,通过此法检测样品中LH生物活性;SD大鼠通过长期中等强度或大强度运动训练后血清中LH生物活性下降;老年男性与青年男性相比,LH生物活性下降。
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