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草莓（Fragaria×ananassa Duch.）果实的红色源于花青苷的积累。前人研究表明，FaMYB10转录因子是草莓花青苷合成最重要的调控因子，但其上游调控因子尚不清晰。AP2/ERF位于乙烯信号转导最下游，已有研究报道表明其参与调控果实品质，例如香气、质地、风味、色泽等。本文以FaMYB10为靶标，利用双荧光素酶体系，筛选调控果实花青苷合成的AP2/ERF新基因FaRAV1，并确定其调控通路及机制。主要研究结果如下：
1、FaRAV1可激活FaMYB10启动子活性。利用双荧光素酶体系，筛选出可以调控FaMYB10启动子的AP2/ERF基因5个。在果实表达的86个AP2/ERFs中，FaRAV1，FaRAV6，FaERF61，FaERF85，FaERF86对FaMYB10启动子具有激活效应，其中FaRAV1对FaMYB10启动子具有最强激活效应，约4.0倍。
2、FaRAV1可结合FaMYB10启动子。酵母单杂试验表明FaRAV1可直接结合FaMYB10启动子；EMSA验证了FaRAV1的结合位点是FaMYB10启动子的CAACA元件。
3、FaRAV1是草莓果实花青苷合成的激活子。草莓果实瞬时过表达FaRAV1，可诱导FaMYB10表达增强，花青苷合成结构基因表达上调，花青苷含量显著增加。同时，草莓果实RNAi试验表明，FaRAV1基因被干扰后，FaMYB10及花青苷合成结构基因的表达均下调，花青苷含量也显著降低。
4、FaRAV1还可以直接调控花青苷合成结构基因。双荧光素酶试验表明FaRAV1对花青苷合成结构基因有一定的激活效应。酵母单杂交试验表明FaRAV1可通过直接结合并激活FaCHS，FaF3H，FaDFR，FaGT1启动子，参与花青苷合成。
综上所述，本研究鉴别得到了1个草莓花青苷合成通路中FaMYB10的上游新型转录因子FaRAV1，可通过激活FaMYB10，间接促进花青苷合成，同时也可直接激活花青苷生物合成结构基因FaCHS，FaF3H，FaDFR和FaGT1启动子活性，进而促进草莓花青苷合成积累。
1、FaRAV1可激活FaMYB10启动子活性。利用双荧光素酶体系，筛选出可以调控FaMYB10启动子的AP2/ERF基因5个。在果实表达的86个AP2/ERFs中，FaRAV1，FaRAV6，FaERF61，FaERF85，FaERF86对FaMYB10启动子具有激活效应，其中FaRAV1对FaMYB10启动子具有最强激活效应，约4.0倍。
2、FaRAV1可结合FaMYB10启动子。酵母单杂试验表明FaRAV1可直接结合FaMYB10启动子；EMSA验证了FaRAV1的结合位点是FaMYB10启动子的CAACA元件。
3、FaRAV1是草莓果实花青苷合成的激活子。草莓果实瞬时过表达FaRAV1，可诱导FaMYB10表达增强，花青苷合成结构基因表达上调，花青苷含量显著增加。同时，草莓果实RNAi试验表明，FaRAV1基因被干扰后，FaMYB10及花青苷合成结构基因的表达均下调，花青苷含量也显著降低。
4、FaRAV1还可以直接调控花青苷合成结构基因。双荧光素酶试验表明FaRAV1对花青苷合成结构基因有一定的激活效应。酵母单杂交试验表明FaRAV1可通过直接结合并激活FaCHS，FaF3H，FaDFR，FaGT1启动子，参与花青苷合成。
综上所述，本研究鉴别得到了1个草莓花青苷合成通路中FaMYB10的上游新型转录因子FaRAV1，可通过激活FaMYB10，间接促进花青苷合成，同时也可直接激活花青苷生物合成结构基因FaCHS，FaF3H，FaDFR和FaGT1启动子活性，进而促进草莓花青苷合成积累。