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细胞因子是在抗原递呈细胞(APCs)、淋巴细胞和其它宿主细胞间发挥调节作用的一类高活性多功能的蛋白质多肽分子。白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-18(IL-18)在介导体液免疫反应、细胞免疫反应、抵抗微生物感染和抗肿瘤方面均起着非常重要的作用。根据GenBank中发表的山羊IL-4和IL-18基因序列,设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出了山羊IL-4和IL-18的全序列(pGIL-4, pGIL-18),将二者克隆到pMD18-T载体中,经酶切分析、序列测定鉴定及序列分析,克隆得到的pGIL-4基因的开放阅读框含有408个核甘酸,编码135个氨基酸,包含24个氨基酸的信号肽。PGIL-18全基因有582个碱基,编码193个氨基酸,前36个氨基酸残基为前导肽。通过CLUSTALX和MEGA4.0软件绘制了多种哺乳动物IL-4和IL-18的氨基酸进化树。自pMD-pGIL-4和pMD-pGIL-18中分别扩增其成熟蛋白(InIL-4和mGIL-18)基因,并将其亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pET-28a(+)中,构建了pET-32a(+)-mGIL-4和pET-28a(+)-mGIL-18原核表达载体,然后分别转化至大肠杆菌感受态BL21中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明所得到重组蛋白分别约为31.3KDa和22.3KDa.将这两个重组蛋白经超声波裂解,主要包涵体形式表达。利用MTT法检测山羊重组白介素-4(rmGIL-4)对山羊外周血T淋巴母细胞的增殖活性,发现rmGIL-4能显著刺激山羊外周血T淋巴母细胞的增殖,并在一定剂量范围内,呈现一定的量效关系,在8μg/ml时对T淋巴母细胞的刺激效应最强。为了检测山羊重组白介素-18(rmGIL-18)在体外促进小鼠腹腔巨噬细胞和分泌NO的效应,本实验检测了小鼠腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬能力,并测定了rmGIL-18作用于巨噬细胞后细胞培养液中NO的浓度,结果显示rmGIL-18对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和NO的生成有显著的调节作用,且呈现剂量相关性。在一定范围内随rmIL-18剂量的增加而相应增高,当rmIL-18浓度为500ng/ml时,巨噬细胞的吞噬能力最强；而IL-18在250ng/ml时,NO的分泌功能最强。