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CIDE蛋白质家族(CIDEs)在人中有3个成员,它们分别是CIDE-A、CIDE-B和CIDE-C。其中CIDE-C是实验室发现并克隆的。CIDE是一类新的诱导细胞凋亡的蛋白质家族,但是它们的作用机制目前并不清楚。前期研究发现,CIDEs并不定位在线粒体上,而是部分与脂肪滴共定位,提示CIDEs诱导细胞凋亡可能通过一种新的机制。
检测了CIDE-B和CIDE-C的亚细胞定位,发现它们定位于脂肪滴上,它们的脂肪滴定位区域都位于蛋白的C端。CIDE-B的aa166-195片断和CIDE-C的aa140-238片断是脂肪滴定位所必需的区域。又检测了CIDE蛋白诱导细胞凋亡是否依赖caspases。实验结果显示,CIDEs诱导细胞凋亡依赖caspases的激活。
在此基础上,又检测了caspases相关的凋亡信号通路在CIDEs作用下的激活情况。发现CIDEs能激活线粒体通路,通过激活促凋亡蛋白Bax,释放线粒体膜上蛋白细胞色素C和AIF,激活caspase-9和caspase-3,使细胞发生凋亡。还检测了上游的caspase-8和caspase-lO在CIDEs诱导凋亡中的作用。发现CIDEs能与caspase-8和caspase-lO相互作用,共定位于脂肪滴上,并激活caspase-8和caspase-lO。CIDEs激活caspase-8不依赖死亡受体和caspases的连接蛋白FADD(FAS-associated protein with death domain),提示CIDEs可能直接激活caspase-8。
探讨了CIDEs是否与死亡受体通路中的诱导死亡信号复合物上其他相关蛋白有相互作用。发现CIDE-B与TRAF2(TNF receptor-associatedfactor2)和TRADD(TNF receptor1-associated death domain protein)共定位,提示TRAF2和TRADD蛋白可能参与CIDEs诱导凋亡。
总之,研究首次发现CIDEs诱导细胞凋亡依赖caspase的级联反应。CIDEs能与caspase-8和caspase-1O相互作用,共定位于脂肪滴上,从而活化caspase-8和caspase-10,再激活caspase-9和caspase-3,引起细胞发生凋亡。CIDEs的脂肪滴定位是其诱导细胞凋亡所必需的,提示脂肪滴上存在一种新的激活caspases的机制。