高压氧对鼠局灶性脑缺血/再灌流时NO作用及Bcl-2表达的研究

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该研究通过建立大鼠右侧大脑中动脉缺血/再灌流模型,观察了脑缺血/再灌流后不同时相点脑梗塞体积TTC染色、NO主要代谢产物NO<,2->浓度、nNOS和Bcl-2免疫组化染色光镜改变,并用流式细胞仪测试nNOS和Bcl-2表达细胞百分率和荧光强度.同时也观察了HBO、L-NNA和HBA对上述结果的作用,结果显示:1.脑缺血后1h即出现明显的梗塞病灶,HE染色显著梗塞区域脑组织水肿,神经元水肿,有明显的坏死病灶;梗塞病灶体积随缺血/再灌流时间的延长而逐渐增大,经HBO治疗后,明显地抑制了梗塞病灶的增大;2.脑缺血/再灌流时,脑组织中NO含量明显升高,当缺血1hr再灌流时立即进行253、25kPa HBO治疗后,可以明显地降低NO的含量,在再灌流2h时降低明显,但如果在同一时间用相同压力的高压空气治疗,对脑组织中NO含量无明显作用;3.脑缺血/再灌流时,脑神经元nNOS表达的荧光强度明显增高;病灶区域nNOS免疫组化染色神经元出现密集分布、染色增强及胞膜断裂等形态学改变.HBO治疗后nNOS表达的荧光缕指数下降明显,nNOS染色神经元散在分布、染色变浅、胞膜断裂及突起膨大等形态学变化减少,HBA组对脑缺血/再灌流后nNOS的表达量和形态学改变作用不大;4.脑缺血/再灌流在IR30min时,病灶区域Bcl-2表达神经元标记率和荧光指数明显增强,随再灌流时间延长,Bcl-2表达细胞阳性率和荧光指数逐渐下降;HBO治疗不影响缺血/再灌流时Bcl-2的表达,而且明显地增高缺血/再灌流后期Bcl-2表达细胞阳性率和荧光强度;5.在脑缺血/再灌流前30min给予L-NNA后,脑组织神经元nNOS表达荧光强度下降明显,各时相点脑组织NO含量,均显著下降,但同时L-NNA还使Bcl-2阳性细胞标记率和荧光强度下降,病灶梗塞体积不治疗组增大明显.结果提示,HBO治疗减少梗塞病灶体积,由于抑制了nNOS的活性,使NO在病灶区域生成减少,并增加神经元Bcl-2表达,为高压氧有效治疗脑缺血的部分机理,研究人员认为HBO是治疗脑缺血疾病的有效措施之一.
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