【摘 要】
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目的:运用生物信息学技术对该实验室所获得的EST进行分析,发现新基因和可能为潜在药物靶标、候选抗原分子或具诊断潜力的EST.根据这些EST序列信息,从文库或mRNA中扩增未知片
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目的:运用生物信息学技术对该实验室所获得的EST进行分析,发现新基因和可能为潜在药物靶标、候选抗原分子或具诊断潜力的EST.根据这些EST序列信息,从文库或mRNA中扩增未知片段,获得全长基因.用生物信息学方法对全长基因进行鉴定后,克隆编码区,对新基因进行结构和功能预测.用DNA免疫技术,研究新基因的保护性效果.结论:①发现了SjCyPA、SjLDH和SjCKⅡβ三个新基因.其中SjCKⅡβ基因注册GenBank,获得登录号:AY241391.用生物信息学方法对三个新基因所推导的氨基酸序列的结构和功能进行了预测和分析.②对SjCyPA、SjLDH和SjCKⅡβ编码区的cDNA序列和DNA序列进行了比较,发现SjCyPA的DNA序列有一个35bp的内含子,SjLDH和SjCKⅡβ的DNA编码区序列中没有内含子.③构建重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达了SjCyPA、SjLDH以及SjCKⅡβ的重组融合蛋白.Western-blot鉴定SjCyPA及SjCKⅡβ具有免疫反应性.④运用核酸免疫技术,观察了小鼠模型中含SjCyPA、SjLDH和SjCKⅡβ基因编码区DNA免疫引起的免疫反应以及抗攻击感染的保护性效果.
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