CFDA-SE标记的IPECs实验移植入兔视网膜下腔

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxzjlei
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观察经羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记的虹膜色素上皮细胞(IPECs)移植入视网膜下腔后的表达情况。方法:将30只青紫兰兔分成两组:第一组二十只,为自体移植组;第二组十只,为异体移植组。分别在第14天、30天、60天和90天处死动物,依次标记为A、B、C和D组,应用眼底荧光血管造影(FFA)及光学相干断层扫描(OCT)等方法进行大体观察,同时应用透射电镜及免疫组化等方法来观察细胞形态及紧密连接蛋白。结果:观察到B1、B2组的IPECs在视网膜下腔形成团块状聚集,D1组的IPECs嵌插在原始的RPECs之间,形成轮廓不规则的细胞单层,荧光显微镜下可以明显区分出发出绿色荧光的IPECs与原始的RPECs。利用透射电镜可观察到A1、A2、B1、B2、C1、C2和D1这七组的IPECs形态完好:顶端可见微绒毛,细胞质可见黑色素颗粒、线粒体、粗面内质网等,但随移植时间的推移,IPECs内黑色素颗粒明显减少。后五组细胞间可观察到紧密连接结构。而D2组的IPECs形态则被破坏:微绒毛几乎消失,线粒体大量空泡变性,基膜不完整且质膜内褶消失。B1、B2、C1、C2组的actin、zo-1蛋白在移植区不规则散布,D1组则在Bruchs膜上有规律地间断分布。结论:actin、zo-1蛋白可以在移植后一个月时形成,而且有望替代血-视网膜外屏障;经CFDA-SE标记的IPECs在视网膜下腔易于识别,为深入研究其在视网膜下腔的移行增殖提供了依据。
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