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目的:研究全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)能否逆转非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)富集干细胞样细胞介导的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI)耐受，并探讨其潜在的机制。 方法:运用突变扩增系统(amplification refractory mutation system，ARMS)法检测NSCLC细胞的基因突变状态;应用结晶紫染色法检测吉非替尼和ATRA对NSCLC细胞的生长抑制作用;采用流式细胞术检测NSCLC细胞乙醛脱氢酶A1(aldehyde dehydrogenase A1)的活性及CD44的表达。 结果:H1650细胞及高浓度吉非替尼诱导四代后残留活细胞均为EGFR19-Del基因突变;A549细胞及高浓度吉非替尼诱导四代后残留活细胞均未检测到EGFR基因Exon-18、Exon-19、Exon-20、Exon-21外显子突变。短时间高浓度吉非替尼诱导NSCLC细胞不会发生EGFR基因二次突变。以高浓度吉非替尼诱导H1650细胞四代，建立吉非替尼耐受细胞(H1650/GR)，与亲代H1650细胞相比，H1650/GR细胞IC50提高1.61倍，耐受吉非替尼能力显著增强(P＜0.001)，ALDHA1活性和CD44表达也显著升高(P＜0.05);高浓度吉非替尼诱导A549四代，建立对吉非替尼耐受细胞(A549/GR)，与亲代A549细胞相比，A549/GR细胞IC50提高1.35倍，耐药能力显著增强(P=0.001)，A549/GR细胞ALDHA1活性和CD44表达均显著升高(P＜0.05)。提示吉非替尼诱导NSCLC四代后富集了干细胞样标记物ALDHA1和CD44。IC20浓度ATRA诱导H1650/GR1/3/5天与未加ATRA组相比，其ALDHA1活性和CD44表达均显著降低(P＜0.05)（其中ALDHA1活性至第5天已下降6.81倍，CD44表达比例下降2.44倍），序贯吉非替尼培养72h后，结果发现:与未使用ATRA诱导组相比，ATRA诱导组IC50明显下降(P＜0.05)（其中ATRA诱导5天组IC50已下降1.49倍），ATRA诱导组对吉非替尼反应显著提高;IC20浓度ATRA诱导A549/GR1/3/5天与未加ATRA组相比，其ALDHA1活性和CD44表达均显著降低(P＜0.05)（其中ALDHA1活性至第5天已下降9.75倍，CD44表达比例下降2.48倍），序贯吉非替尼培养72h后，结果发现:与未使用ATRA诱导组相比，ATRA诱导组IC50明显下降(P＜0.05)（其中ATRA诱导5天组IC50已下降1.28倍），ATRA诱导组对吉非替尼反应显著提高。ALDHA1与CD44呈强正相关(P＜0.01)，提示ALDHA1与CD44可作为NSCLC的共表达干细胞样标记物。 结论:短时间高浓度吉非替尼能诱导NSCLC富集ALDHA1hi CD44hi干细胞样细胞。ATRA通过下调ALDHA1活性可逆转NSCLC干细胞样细胞介导的EGFR-TKI耐受。