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黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)为茄科枸杞属,多分布在我国西北地区,其成熟果实呈紫黑色,富含花色苷等酚类物质,具有很高的药用价值和食用价值,抗氧化活性较高。黑果枸杞中花色苷稳定性较差,现有研究中主要以花色苷的含量为指标,但忽略了颜色变化情况,本文通过建立化学成分与颜色参数之间的联系,为其今后的开发与利用提供指导。主要研究内容及结果如下:
(1)通过单因素实验(包括静态萃取温度、乙醇浓度、静态萃取时间、静态萃取压力和循环次数五个因素)与响应面试验对高效溶剂萃取法提取黑果枸杞中花色苷的工艺进行优化,确定最佳提取条件为:温度44℃,乙醇浓度60%,提取时间4min,静态萃取压力8MPa,循环2次,在此条件下,花色苷提取得率为20.074mg/g。
(2)采用CIELAB色空间法研究黑果枸杞提取物的稳定性,考察温度、pH两个外界因素对其稳定性的影响,最终确定最适保存温度为4℃、pH值为2.5,表明酸性条件和低温条件有助于黑果枸杞提取物溶液的保存。
(3)利用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-Q TOF MS)对黑果枸杞提取物中的化学成分进行分析,通过质谱信息以及文献查阅,鉴定出11种酚类化合物,其中包括1种酚酸,6种酚酰胺类化合物,2种黄酮类化合物,2种花色苷类化合物,其中最主要的成分是矮牵牛素-3-O-芸香糖苷(咖啡酰)-5-O-葡萄糖苷。
(4)通过建立12批次黑果枸杞UPLC指纹图谱,对所建指纹图谱进行相似度评价,12批次黑果枸杞的相似度均在0.92以上,表明不同批次的黑果枸杞质量比较一致;选用不同参数进行聚类分析(HCA),选取7个共有峰峰面积为变量进行聚类,可分为4类,以矮牵牛素-3-O-芸香糖苷(咖啡酰)-5-O-葡萄糖苷峰面积为变量进行聚类,可分为5类,表明聚类参数不同,聚类结果略有差异;采用主成分分析(PCA),以贡献率大于5%为提取标准,得到4个主成分,累积贡献率达到95.20%。
(5)通过改变黑果枸杞提取物溶液的pH,结合CIELAB色空间法和紫外-可见分光光度法对其颜色和化学成分进行测定,并通过UPLC法测定黑果枸杞提取物中14种化学成分的峰面积,对峰面积与颜色参数L*、a*、b*值进行相关性分析,结果表明6种化合物与L*、a*、b*值均具有中等程度及以上的相关关系;对6种化学成分的峰面积与颜色参数进行多元线性回归分析得到回归方程,P值均小于0.05,表明6种化学成分峰面积与颜色参数的回归方程具有统计学意义。
(1)通过单因素实验(包括静态萃取温度、乙醇浓度、静态萃取时间、静态萃取压力和循环次数五个因素)与响应面试验对高效溶剂萃取法提取黑果枸杞中花色苷的工艺进行优化,确定最佳提取条件为:温度44℃,乙醇浓度60%,提取时间4min,静态萃取压力8MPa,循环2次,在此条件下,花色苷提取得率为20.074mg/g。
(2)采用CIELAB色空间法研究黑果枸杞提取物的稳定性,考察温度、pH两个外界因素对其稳定性的影响,最终确定最适保存温度为4℃、pH值为2.5,表明酸性条件和低温条件有助于黑果枸杞提取物溶液的保存。
(3)利用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-Q TOF MS)对黑果枸杞提取物中的化学成分进行分析,通过质谱信息以及文献查阅,鉴定出11种酚类化合物,其中包括1种酚酸,6种酚酰胺类化合物,2种黄酮类化合物,2种花色苷类化合物,其中最主要的成分是矮牵牛素-3-O-芸香糖苷(咖啡酰)-5-O-葡萄糖苷。
(4)通过建立12批次黑果枸杞UPLC指纹图谱,对所建指纹图谱进行相似度评价,12批次黑果枸杞的相似度均在0.92以上,表明不同批次的黑果枸杞质量比较一致;选用不同参数进行聚类分析(HCA),选取7个共有峰峰面积为变量进行聚类,可分为4类,以矮牵牛素-3-O-芸香糖苷(咖啡酰)-5-O-葡萄糖苷峰面积为变量进行聚类,可分为5类,表明聚类参数不同,聚类结果略有差异;采用主成分分析(PCA),以贡献率大于5%为提取标准,得到4个主成分,累积贡献率达到95.20%。
(5)通过改变黑果枸杞提取物溶液的pH,结合CIELAB色空间法和紫外-可见分光光度法对其颜色和化学成分进行测定,并通过UPLC法测定黑果枸杞提取物中14种化学成分的峰面积,对峰面积与颜色参数L*、a*、b*值进行相关性分析,结果表明6种化合物与L*、a*、b*值均具有中等程度及以上的相关关系;对6种化学成分的峰面积与颜色参数进行多元线性回归分析得到回归方程,P值均小于0.05,表明6种化学成分峰面积与颜色参数的回归方程具有统计学意义。