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目的:注射用炎琥宁是一种临床常用的抗病毒药物，在临床应用中出现了肝肾损伤、血象异常等副作用。本研究针对注射用炎琥宁在使用过程中存在的配伍禁忌和酸、碱及氧化条件的变化对药物稳定性的影响，从主体成分脱水穿心莲内酯二琥珀酸半酯钾钠盐这一结构出发，着重分析注射用炎琥宁受外界影响后化学结构变化的实质和产物，并对结构变化前后的有关物质做对比，进而明确结构变化与其临床不良反应的相关性，旨在为注射用炎琥宁临床安全用药提供相关借鉴。 方法:运用HPLC法分析注射用炎琥宁与常用溶媒和六种常用抗菌药物的稳定性和相互作用，在此基础上，运用LC-TOF-MS2法分析并鉴定酸、碱及氧化条件诱导下炎琥宁的结构变化，同时通过体外溶血试验、家兔耳缘静脉血管刺激性试验和小鼠体内毒性试验对酸降解产物的毒性进行评价。 结果:注射用炎琥宁在常用溶媒中的稳定性研究表明:注射用炎琥宁生理盐水溶液(1.6 mg/ml)的pH为6.7～6.9，HPLC分析显示0～6 h内炎琥宁峰面积变化较小，较为稳定;注射用炎琥宁5％葡萄糖注射液溶液(1.6 mg/ml)的pH为5.8～6.3，HPLC分析显示0～6 h内炎琥宁峰面积变化较小，但因5％葡萄糖注射液pH4.5～4.8呈弱酸性，随着溶媒体积的增加，pH降低较为明显，影响注射用炎琥宁的稳定性。与临床常用抗菌药物配伍研究表明:注射用炎琥宁可与头孢类、青霉素类、阿奇霉素及甲硝唑配伍使用，但与喹诺酮类、氨基糖苷类配伍时出现浑浊或者沉淀，有明显的配伍禁忌。 酸、碱及氧化条件下的稳定性研究表明:在酸条件下，随着pH的降低，注射用炎琥宁快速分解，HPLC分析显示，注射用炎琥宁在HCL(pH4)溶液中30 min即出发生分解，产生杂质峰，在较为极端条件下(pH≤3)的分解产物与弱酸环境下分解产物基本一致;在碱性条件下，随着pH的升高，注射用炎琥宁迅速分解，HPLC分析显示，其在pH9的NaOH溶液中会完全分解，同时发现部分酸、碱条件下产物保留时间一致;HPLC分析显示其在30％H2O2溶液中完全降解。 LC-TOF-MS2分析显示:对注射用炎琥宁在pH3条件下的降解产物进行分析鉴定，共分析检测出21个峰，其中m/z577为主要降解产物，结合二级质谱裂解碎片，鉴定为注射用炎琥宁脱单个琥珀酰基产物，对pH9条件下的降解产物进行分析鉴定，检测出27个峰，部分成分保留时间、准分子峰与酸降解分解产物相近，结合MS/MS二级质谱裂解规律，分析降解产物主要有双键移位、内酯开环产物;质谱裂解规律说明在正离子模式下，采用LC-Q-TOF-MS2技术，穿心莲内酯易脱去羧酸根，出现依次脱掉m/z44的碎片峰。因结构含有K+、Na+，在质谱中，围绕主体结构脱去单、双脱琥珀酰基，继而出现多组2 Na+、2 K+、或单个Na+、K+峰，[M+H-H2O]+、[M+H-H2O-OOCCH2CH2COO]+、[M+2 Na-H2O]+与[M+2 K-H2O-OOCCH2CH2COO]+的碎片峰，同时在二级质谱中也伴有环开裂和双键移位反应所产生的碎片。 药理毒理实验结果表明:体外溶血试验中，注射用炎琥宁及其酸降解产物均未见溶血现象。血管刺激试验显示，注射用炎琥宁组出现了轻度的内皮细胞肿胀，血管外可见红血球，随着时间的延长而基本恢复正常;注射用炎琥宁酸降解产物组出现了轻度的内皮细胞肿胀，血管外可见红血球，且没有随时间的延长恢复正常，同时血管外伴有少许炎性细胞浸润。动物毒性试验结果表明:在尿素氮(BUN)检测中，与对照组（5％葡萄糖注射液）相对比注射用炎琥宁组BUN值升高，注射用炎琥宁酸降解产物组BUN值显著降低(P＜0.05);在肌酐（CRE）检测中，与对照组（5％葡萄糖注射液）相比注射用炎琥宁及其酸降解产物组CRE值显著升高(P＜0.01);谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)检测结果显示:与对照组(5％葡萄糖注射液)相比注射用炎琥宁酸降解产物组GPT和GOT值显著升高(P＜0.01)。 组织病理学检查结果表明:注射用炎琥宁组有3例肾脏病变，多为肾小管肿胀，肾小管上皮细胞变性;有3例肺病变，多为肺局部未见肺泡，有少许炎性细胞浸润，部分肺泡增生;有4例肝脏病变，多为肝细胞变性，染色质稀疏;心脏未出现异常病变。注射用炎琥宁酸降解产物组4例肾脏病变，多为肾小球水肿，肾小囊消失，肾小管上皮细胞变性，个别典型的病理图片还出现肾小球破损，肾小囊内可见颗粒物;有4例肺病变，多为未见明显肺泡，肺间隔增生变宽，有少许炎性细胞浸润;有3例肝脏病变，多为肝细胞空洞变性;较为突出的是，酸降解产物在心脏方面的损伤较为明显，出现5例心脏病变，多为心肌细胞变性，染色质减少。 结论:注射用炎琥宁与常用溶媒配伍稳定性较好，在药物配伍中不宜与喹诺酮类、氨基糖苷类联合用药:注射用炎琥宁在pH5～8范围内稳定性相对良好，但在pH＜5或pH＞8的溶液环境下开始分解，通过LC-MS分析得由酸、碱条件诱导的次生产物可达20种以上，这些次生产物的产生可增加不良反应发生率。注射用炎琥宁降解产物毒性评价试验中，注射用炎琥宁及其酸降解产物没有溶血现象，可初步确定在一定浓度下不具有溶血作用;注射用炎琥宁具有一定的血管刺激性作用，但随时间延长可基本恢复正常，这与文献中报道的关于注射用炎琥宁对皮肤及附件和血象异常的不良反应有一定的相似性，而注射用炎琥宁酸降解产物对血管产生的损伤较难恢复，可能与注射用炎琥宁的临床不良反应具有一定得相关性，也为后续的研究工作提供参考。小鼠尾静脉注射炎琥宁及其酸降解产物后与对照组相比，其血浆中GPT、GOT、CRE、BUN等指标出现了不同程度的变化，结合小鼠的心、肝、肺、肾等组织病理学检查，发现注射用炎琥宁及其酸降解产物能够不同程度的引起小鼠心、肝、肺、肾等脏器的损伤。本研究初步揭示了注射用炎琥宁酸降解产物与临床不良反应的相关性，为下一步的实验提供依据。