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雪 上 一 枝 蒿 (Aconiti Brachypodi Radix) 是 毛 莨 科(Ranunculaceae) 乌头属 (Aconitum) 植物短柄乌头 (Aconitum brachypoaum Diels) 的药用块根，其化学成分主要为乌头类生物碱，被用于治疗风寒湿痹所致的筋骨和关节疼痛、跌打损伤所致的瘀血疼痛及虫蛇咬伤等症，具有消炎止痛、祛风除湿的功效。但是雪上一枝蒿有剧毒，使用不当容易中毒，甚至导致死亡。虽然目前对雪上一枝蒿的中毒机制研究较为深入，但是对于针对其毒性的天然解毒剂、解毒机制研究的较少。金不换又名黄秦艽 Veratrilla baillonii Franch，为龙胆科(Gentianaceae)滇黄芩属植物黄秦艽的干燥根。纳西族医生擅长使用金不换，常用金不换水煎液来解乌头类药物引起的中毒。 本论文将分别从体内和体外评价金不换对雪上一枝蒿毒性的解救作用，寻找其有效物质基础，并探讨其作用靶点及作用机制。 主要研究内容如下： 1. 大鼠亚急性毒性研究 实验以大鼠为研究对象，灌胃给药雪上一枝蒿总生物碱(40 mg/kg)14天，再灌胃给药金不换水提物(25，50，100 mg/kg)14天，以体重变化、血液生化指标、病理切片以及代谢酶的改变来评价金不换对雪上一枝蒿致大鼠亚急性毒性的解救作用。结果表明：雪上一枝蒿使大鼠的心、肝、肾、脑都发生了不同程度的明显异常病变，显著性增加大鼠血液中ALT、AST、ALP、CREA、TG含量，诱导肝药酶CYP3A1/2，抑制心脏Na+-K+-ATP酶，上调心肌钠钙交换体和钠离子 通道的 mRNA 表达水平；金不换可以缓解由雪上一枝蒿所导致的上述指标的升高。通过上调Na+-K+-ATP酶，使胞内钠钙离子浓度趋于平衡，抑制胞内钙离子超载从而达到对心脏的保护作用。 2. 金不换水提物对乌头碱致大鼠心肌细胞 H9c2 损伤的保护作用研究 实验以大鼠心肌细胞H9c2为研究对象，采用MTT法研究10 μM的乌头碱与不同浓度金不换水提物对H9c2细胞增殖的影响，试剂盒检测细胞释放的 LDH、SOD 活力，RT-PCR 检测相关基因的表达水平，流式细胞仪检测胞内 ROS。结果显示金不换能够保护乌头碱所致的心肌细胞损伤，延缓细胞氧化应激损伤。 3. 獐芽菜苷对乌头碱致大鼠心肌细胞H9c2损伤的保护作用研究 实验以大鼠心肌细胞H9c2为研究对象，采用MTT法研究不同浓度乌头碱以及金不换水提物中6个单体干预下对H9c2细胞存活率影响，试剂盒检测细胞释放的LDH、MDA、SOD含量，RT-PCR 检测相关基因的表达量，JC-1荧光染色检测线粒体膜电位，用荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧 (ROS) 水平，Flou-3/AM测定细胞内钙离子浓度，激光共聚焦显微镜实时检测细胞内钙离子浓度变化情况。结果表明：乌头碱的IC50为32 μM，10 μM的乌头碱为实验最佳浓度，乌头碱使细胞内的 LDH、MDA 释放量显著性升高，而降低细胞内SOD的活力，同时使ROS和钙离子浓度以及相关mRNA表达量显著增高，并诱导细胞凋亡。獐芽菜苷对细胞存活率影响最大，通过清除细胞内的 ROS，降低钙离子的释放，降低对线粒体的损害，提高细胞的存活率，从而达到解毒的作用。表明其为金不换的药效物质基础之一。