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实验目的： 骨关节炎（Osteoarthritis，OA）是一种进行性的关节功能障碍和关节软骨退变的疾病，是患者以关节持续疼痛为特点的慢性关节疾病。炎症相关因子在OA的病情发生和进展中起到十分关键的作用。作为一个十分重要的炎症因子，IL-1β被广泛地用于OA体外微环境的模拟。细胞的炎症反应与凋亡反应均在OA的疾病发生和发展中起到了至关重要的作用。关节软骨组织由较少的软骨细胞和占大部分体积的细胞外基质（EMC）共同组成。其中软骨细胞的分化程度较高，自身增殖、再生能力较差。而软骨细胞的最主要的功能即为合成与分泌软骨细胞外基质及其相关的蛋白酶类，同时负责维持软骨细胞外基质的新陈代谢生理平衡。对于OA的治疗，临床上通常是以控制疼痛和消除关节肿胀等症状来延缓OA的病情进展，从而达到改善患者生活质量的目的。如今，已有许多治疗OA的药物面世，并且已用投入临床使用。例如非甾体类消炎药（NSAIDs）、氨基葡萄糖类药物、透明质酸钠以及硫酸软骨素类药物等。虽然市面上有着许许多多的OA治疗药物，但其大多数只能缓解OA的临床症状，并不能阻止OA的病理进展。栀子苷（Geniposide，GPO）是一种以环烯醚萜结构为特点的葡萄糖苷类物质，水溶性良好，是我国中药栀子发挥其药效的主要成分之一。栀子苷对人体的心血管系统、消化系统以及大脑的中枢神经系统疾病等均有一定的药理作用。除此之外，有研究发现GPO还具有一定的消炎、镇痛等其他的相关药理作用。GPO在OA治疗方面的应用尚未有过相关报道，本实验旨在探讨GPO对于OA是否具有治疗作用以及其作用的机制。 实验方法： 在本研究中，我们使用大鼠软骨细胞作为大鼠关节炎的体外模型，以此检测了GPO对于大鼠OA的治疗效果。本实验通过使用CCK-8细胞活力检测试剂盒检测了GPO对于软骨细胞的相对细胞毒性作用强度。利用ELISA等方法检测并分析了NO和PGE2在大鼠软骨细胞中的相对表达量。使用Western blot法检测Collagen Ⅱ、INOS、COX-2、MMP-13等蛋白在软骨细胞中的表达水平的变化，与此同时检测分析了凋亡相关的蛋白Bcl-2、Bax、Cyto-c和C-caspase-3的相对表达水平的变化。对于PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白（p-p65、p-IκB、p-PI3K和p-AKT）在软骨细胞中的相关变化，我们同样使用了Western blot法进行检测与分析。通过免疫荧光法检测NF-κB信号通路的核移位现象，并使用TUNEL方法检测了软骨细胞的凋亡现象。除此之外，我们还制作了大鼠关节炎的动物OA模型，并使用H-E和S-O对关节组织进行染色处理评估，并以此进一步验证了GPO对于动物OA的具体的疗效。 实验结果： 本实验中，我们证明了GPO可以在一定程度上抑制由IL-1β诱导的大鼠软骨细胞分泌INOS、COX-2和MMP-13等炎症介质的作用，并同时促进Collagen Ⅱ等软骨细胞外基质的合成与分泌。此外，我们还发现GPO可以在一定程度上抑制促凋亡相关的蛋白如Bax、Cyto-c和C-Caspase-3的相对表达，并同时促进抑凋亡相关的蛋白Bcl-2的大量表达。上述的实验结果产生的原因可能是因为GPO可以抑制由IL-1β介导的PI3K/Akt/NF-κB信号通路的活化。在大鼠OA模型的体内实验中，我们同样发现并证明了GPO可以延缓大鼠OA的疾病进展程度。 实验结论： GPO可以通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路的激活来调节OA中炎症介质及凋亡相关蛋白的表达，从而起到治疗OA的作用。