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目的：1. 研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对神经胶质瘤细胞Notch2信号通路的抑制作用并阐明其发生机制。2. 明确NAC对Notch2信号的抑制效应对体内外神经胶质瘤生长的影响，为NAC用于神经胶质瘤的临床治疗提供一定的实验和理论依据。
方法：1. 分别用Western Blottingting和Real Time-PCR实验检测NAC对U87和U251细胞Notch1、Notch2、Notch3、Notch4、Hes1和Hey1蛋白水平的影响，Notch2、Hes1和Hey1 mRNA水平的影响，以及CCK8实验观察NAC、si-Notch2和si-Notch3对U87和U251细胞活力的影响。2. Western Blotting实验观察NH4Cl和MG132对NAC抑制U87细胞Notch2蛋白水平的影响，以及NAC对Itch和GRMP5，si-Itch对NAC抑制Notch2蛋白水平的影响。3. 活性氧（ROS）实验检测NAC、谷胱甘肽（GSH）和依布硒啉（Ebselen）对U87和U251细胞内ROS水平的影响，Western Blotting实验检测以上药物对Notch2蛋白水平的影响，GSH实验检测丁硫氨酸-亚砜亚胺（BSO）对NAC产生的细胞内GSH水平的影响，以及Western Blotting实验检测BSO对NAC抑制Notch2蛋白水平的影响。最后CCK8实验观察BSO对NAC抑制细胞活力的影响。4. CCK8实验观察pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞活力的影响，PI染色后流式细胞术检测上述处理对细胞周期的影响，以及Western Blotting实验检测上述处理对p21、CyclinE和CDK2蛋白水平的影响。5. Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术检测pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞凋亡的影响，以及Western Blotting实验检测上述处理对Bcl-2和Bax蛋白水平的影响。6. 划痕实验和Transwell侵袭实验评估pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞迁移和侵袭的影响。7. U87细胞建立皮下移植瘤模型，定期给小鼠尾静脉注射NAC和/或BSO，观察不同处理组动物的肿瘤组织大小，HE染色观察组织坏死情况，Ki-67检测增殖情况，TUNEL染色观察凋亡率，以及Western Blotting实验检测上述处理对肿瘤组织中Notch2和Hes1蛋白水平的影响。
结果：1. NAC能够呈浓度和时间依赖性的抑制U87和U251细胞Notch2和Notch3的蛋白表达水平及其下游信号分子Hes1和Hey1的mRNA和蛋白表达水平。2. NAC能够促进Notch2经溶酶体途径降解，该作用与NAC上调Itch的表达水平有关。3. NAC对Notch2和细胞活力的抑制作用与细胞内的GSH和ROS水平无关。4. NAC通过下调Notch2来抑制U87和U251细胞的增殖、迁移和侵袭。5. NAC能够有效抑制神经胶质瘤在体内的生长。
结论：NAC通过促进Notch2经溶酶体途径降解来抑制神经胶质瘤细胞的恶性，且该效应与抗氧化作用无关，NAC能抑制神经胶质瘤在体内的生长，该研究结果为NAC用于神经胶质瘤的治疗提供了一定的实验和理论依据。
方法：1. 分别用Western Blottingting和Real Time-PCR实验检测NAC对U87和U251细胞Notch1、Notch2、Notch3、Notch4、Hes1和Hey1蛋白水平的影响，Notch2、Hes1和Hey1 mRNA水平的影响，以及CCK8实验观察NAC、si-Notch2和si-Notch3对U87和U251细胞活力的影响。2. Western Blotting实验观察NH4Cl和MG132对NAC抑制U87细胞Notch2蛋白水平的影响，以及NAC对Itch和GRMP5，si-Itch对NAC抑制Notch2蛋白水平的影响。3. 活性氧（ROS）实验检测NAC、谷胱甘肽（GSH）和依布硒啉（Ebselen）对U87和U251细胞内ROS水平的影响，Western Blotting实验检测以上药物对Notch2蛋白水平的影响，GSH实验检测丁硫氨酸-亚砜亚胺（BSO）对NAC产生的细胞内GSH水平的影响，以及Western Blotting实验检测BSO对NAC抑制Notch2蛋白水平的影响。最后CCK8实验观察BSO对NAC抑制细胞活力的影响。4. CCK8实验观察pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞活力的影响，PI染色后流式细胞术检测上述处理对细胞周期的影响，以及Western Blotting实验检测上述处理对p21、CyclinE和CDK2蛋白水平的影响。5. Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术检测pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞凋亡的影响，以及Western Blotting实验检测上述处理对Bcl-2和Bax蛋白水平的影响。6. 划痕实验和Transwell侵袭实验评估pcDNA3.1-Notch2对NAC和BSO共同作用后的U87和U251细胞迁移和侵袭的影响。7. U87细胞建立皮下移植瘤模型，定期给小鼠尾静脉注射NAC和/或BSO，观察不同处理组动物的肿瘤组织大小，HE染色观察组织坏死情况，Ki-67检测增殖情况，TUNEL染色观察凋亡率，以及Western Blotting实验检测上述处理对肿瘤组织中Notch2和Hes1蛋白水平的影响。
结果：1. NAC能够呈浓度和时间依赖性的抑制U87和U251细胞Notch2和Notch3的蛋白表达水平及其下游信号分子Hes1和Hey1的mRNA和蛋白表达水平。2. NAC能够促进Notch2经溶酶体途径降解，该作用与NAC上调Itch的表达水平有关。3. NAC对Notch2和细胞活力的抑制作用与细胞内的GSH和ROS水平无关。4. NAC通过下调Notch2来抑制U87和U251细胞的增殖、迁移和侵袭。5. NAC能够有效抑制神经胶质瘤在体内的生长。
结论：NAC通过促进Notch2经溶酶体途径降解来抑制神经胶质瘤细胞的恶性，且该效应与抗氧化作用无关，NAC能抑制神经胶质瘤在体内的生长，该研究结果为NAC用于神经胶质瘤的治疗提供了一定的实验和理论依据。