荧光方法分析植酸的研究

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植酸是一种广泛存在于自然界的肌醇磷酸酯的混合物,它的生物学功能还具有一定的争议。而且,在不同的条件下,植酸的化学性质是相当复杂的。在过去的很长一段时间里,分析不同体系中的植酸一直吸引着许多的研究人员。常用植酸含量的分析方法有酸碱滴定法、三价铁沉淀法、硝酸钍-二甲酚橙法、钼蓝法(上清液差值法)、离子交换-分光光度法、高效液相色谱法、光度检测离子色谱法等。酸碱滴定法、三价铁沉淀法由于影响因素较多,测定误差较大;硝酸钍-二甲酚橙法选择性较高,但试剂昂贵,购买困难;钼蓝法重现性较好,应用范围广,操作简便,快速,是较实用的方法;离子交换-分光光度法、高效液相色谱法和光度检测离子色谱法测定结果可靠,但或因操作烦多,或因设备昂贵,不适于作为常规测定方法,因此各种方法各具优劣。本文建立了两种新的植酸分析方法:取代反应分子荧光分析方法和恒波长同步荧光分析方法,并分别将两种方法应用于人体尿液中的植酸分析和食品中植酸的分析。1.分子荧光分析方法。该方法是以明胶溶液作为反应体系。在激发波长273.5nm,发射波长305.0nm条件下,明胶溶液具有较强的荧光,加入Cu2+后荧光淬灭,再加入植酸,荧光逐渐得到恢复。本方法就是基于取代反应,得到了两段校正曲线,第一部分是植酸含量在0.4-2.4 mg/L的范围,这部分的线性方程为If=-0.895+15.146c(R2>0.9993),第二部分是植酸含量在2.4-9.2 mg/L的范围,该部分的线性方程是If=-29.526+26.113c(R2>0.9996),可分别用来分析不同浓度范围的植酸。将该方法应用于分析人体尿液中植酸的分析,经过和HPLC方法对比,结果准确,稳定。2.同步荧光分析方法。该方法是以邻菲罗啉溶液作为反应体系。在一定的条件下,邻菲罗啉溶液具有较强的同步荧光,在该溶液中加入Fe3+后,荧光淬灭并出现红移现象,再加入植酸溶液后,荧光增强,特征波长的位置也发生变化。该反应是基于植酸、Fe3+和邻菲罗啉形成了一种三元络合物。该方法的校正曲线方程为If=8.770+2.980c(R2>0.9994),线性范围是0.33 mg~32.34 mg/L。将该方法应用于了食品中植酸的分析,通过和紫外—可见分光光度方法对比,该方法的灵敏度高,准确性和稳定性均较好。本文所建立的两种新的识别分析植酸的方法,为植酸的分析提供了新的思路和方向。
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