硼替佐米诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡作用及其作用机制研究

• 作 者: 张跃坤
• 机 构: 中山大学
• 出 处: 中山大学
• 发表日期: 2010年期
• 关键词: 硼替佐米 大脑皮质神经元 凋亡通路 神经毒性作用 剂量效应

实验背景与实验目的：　　
蛋白酶体抑制药硼替佐米近年已用于临床抗肿瘤化疗。其诱发的神经毒性副作用成为剂量限制性不良反应，受到临床学家的重视。硼替佐米神经毒性不良反应包括外周神经炎及可逆性后部白质脑病。至今未见有关硼替佐米中枢神经毒性作用机制的报道。本文实验目的是用大鼠原代培养大脑皮质神经炎研究硼替佐米的神经毒性作用及其作用机制。　　
实验结果：　　
用Hoechst 33258核荧光染色检查不同浓度(0.03、0.3和31μmol/L)硼替佐米处理24h后的大脑皮质神经元，实验结果显示硼替佐米可剂量依赖地诱发神经元凋亡，凋亡率随剂量增加，分别是27.8％、40.6％和53.7％。Westernblot实验结果显示，0.3μmol/L硼替佐米可明显激活p38，加药1h后p38活性达161％(p＜0.05)，6h后达最大效应，活性是对照组的419％(p＜0.01)，并维持至24h;但硼替佐米并不激活JNK。硼替佐米也可激活半胱氨酸蛋白酶caspase-3，1h活性升至143％(p＜0.05)，随后12hcaspase-3活性逐渐回落至112％，在24hcaspase-3激活达到最大效应，活性升至213％(p＜0.01)。p38特异性抑制剂SB203580(10μmol/L、50μmol/L)可降低硼替佐米(0.3μmol/L)诱发的神经元凋亡作用，凋亡率从34.71％降至28.32％和24.06％;同时，SB203580也可显著抑制硼替佐米激活caspase-3。　　
结论：　　
硼替佐米在一定范围内可诱发大鼠大脑皮质神经元凋亡，并有剂量效应关系。在神经元凋亡过程中，硼替佐米可激活p38及caspase-3；p38特异性抑制剂SB203580可拮抗激活的caspase-3，降低硼替佐米诱发神经元的凋亡率。结果提示硼替佐米具有中枢神经毒性作用，其引发神经元凋亡可能与其激活p38和caspase-3凋亡通路有关。