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增殖诱导配体(APRIL)是TNF家族的新成员,在免疫调节中起着重要作用。本实验通过同源克隆,从羊脾脏组织细胞中扩增得753bp羊的增殖诱导配体基因(简称gAPRIL)。羊APRIL的可溶性部分与人APRIL的可溶性部分在蛋白一级结构上有83.20％的相似性。羊APRIL的分子质量为27.87 kDa,预测的等电点为9.54,羊APRIL的可溶性部分的分子质量为16.54,预测的等电点为9.23。gAPRIL的开放读码框由250个氨基酸组成。Real-time PCR结果显示,gAPRIL在免疫器官中表达量较高。用BL21(DE3)高效表达了NusA融合的gsAPRIL蛋白(NusA-His-gsAPRIL),并用SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测其表达。在体外,通过MTT证明该蛋白在anti-IgM存在下对羊脾脏B细胞具有共刺激作用,流式细胞术也证明羊APRIL可以促进羊B细胞的存活。通过激光共聚焦,我们观察到在体外羊可溶性APRIL可以结合于羊脾脏B细胞。有生物活性的羊可溶性APRIL的体外表达为gAPRIL作为一种免疫佐剂应用于提高疫苗效能和免疫治疗的进一步研究打下了基础。