【摘 要】
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小麦的加工品质与小麦麦谷蛋白的组成和含量密切相关,特别是与由Glu-1位点编码的 HMW-GS的组成和含量。其中,1Ax2、1Axl、1Bx17+lBy18、1Bx14+lBy15、1Bx7+1By8、 1Bx7(over-ex
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小麦的加工品质与小麦麦谷蛋白的组成和含量密切相关,特别是与由Glu-1位点编码的 HMW-GS的组成和含量。其中,1Ax2<*>、1Axl、1Bx17+lBy18、1Bx14+lBy15、1Bx7+1By8、 1Bx7(over-expression)和1Dx5+1Dy10亚基与好的加工品质相关,而1AxN、1Bx6、1Bx20和1Dx2+lDy12亚基与较差的加工品质相关。为了改良小麦品质,以上亚基特别是x-型亚基的特异的分子标记已经被建立并应用于品质改良的分子育种。基于传统的鉴定HMW-GS的SDS-PAGE方法和新近发展起来的基于DNA的PCR分析的等位基因特异的分子标记,我们建立了一次反应能够同时鉴定多个HMW-GS的多重PCR的体系。我们以1Ax2<*>+1Bx7+1Dx5的亚基组合摸索了PCR反应组分和循环参数对多重PCR反应结果的影响,其中引物浓度比例和Tm值是关键因素。然后,我们对不同的HMW-GS组合进行多重PCR扩增,总共得到了5种二重PCR组合:1Ax2<*>+1Dx5、1Bx14+lDx5、1Ax1+lDx5、IBx7+1Dx5和1Ax2<*>+1Bx7,6种三重PCR组合:1Ax2<*>+1Bx7+1Dx5、1Ax1+1Bx7+1Dx5、 1Axl+1Bx17+1Dx5、1Ax1+IBx14+1Dx5、1Ax2*+1Bx14+1Dx5和1Ax2*+1Bx7+1Dx5。这些不同的HMW-GS的多重PCR体系的建立可以快速高效的鉴定多个HMW-GS,可以用来进行复合分子标记辅助选择。
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