【摘 要】
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【目的】探讨Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响及其作用机制【方法】将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为:1)对照组(N组):含15%胎牛血清的低糖DMEM培养基继续培养3d(
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【目的】探讨Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响及其作用机制【方法】将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为:1)对照组(N组):含15%胎牛血清的低糖DMEM培养基继续培养3d(葡萄糖浓度为5.5mmol/L);2)高糖组(H组):含15%胎牛血清的低糖DMEM培养基培养1d后,再换用含15%胎牛血清的高糖DMEM培养基(葡萄糖浓度为25.0mmol/L)继续培养2d;3)Ghrelin+高糖组(G组):酰基化Ghrelin(终浓度为10-7mol/L,每孔添加50μl)预处理24h后再加入含15%胎牛血清的高糖DMEM培养基(葡萄糖浓度为25.0mmol/L)继续培养2 d。应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡,RT-PCR法检测各组细胞内caspase-3mRNA的表达,分光光度法检测心肌细胞内caspase-3活性的变化。【结果】与N组比较,H组心肌细胞凋亡率明显增加,caspase-3mRNA表达及caspase-3活性显著升高(P<0.05)。与H组比较,G组心肌细胞凋亡率明显降低,caspase-3mRNA表达及caspase-3活性明显下降(P<0.05)。【结论】1.高糖环境可以引起心肌细胞内caspase-3mRNA的表达上调,caspase-3的活性明显增强,心肌细胞凋亡增加。2.Ghrelin可能通过减少caspase-3mRNA的表达及降低caspase-3的活性来抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡。
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