骨髓增生异常综合征P15基因甲基化及药物去甲基化作用的研究

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目的:检测骨髓增生异常综合征(MDS)p15基因甲基化状态;探讨5-氮杂-2-脱氧胞嘧啶(decitabine)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As<,2>O<,3>)对MDS患者体外培养细胞的去甲基化作用.方法:采用限制性内切酶联合PCR方法检测MDS患者骨髓单个核细胞p15基因甲基化状态,并以β-globin(β珠蛋白)基因扩增产物作为试验内参照,分析其甲基化率.体外培养经检测p15基因高度甲基化的MDS患者外周血单个核细胞,加入decitabine和As<,2>O<,3>进行处理,分析其甲基化率变化情况.结果:低危组MDS患者均未发现p15基因甲基化,80﹪高危组MDS患者和66.6﹪MDS转化为急性白血病的患者发现p15基因高度甲基化.经decitabine和As<,2>O<,3>处理后,培养细胞的甲基化率由药物处理前的19.73﹪降至处理后的8.82~10.06﹪,明显降低至原来的50﹪左右,两种药物间去甲基化效应无明显差别.结论骨髓增生异常综合征的发生与p15基因高度甲基化密切相关,且随病情进展,p15基因高度甲基化出现越频繁.decitabine和As<,2>O<,3>对MDS患者来源的体外培养细胞高度甲基化的p15基因具明显去甲基化作用,两种药物间去甲基化效应无明显差别.
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该研究以人白血病细胞株HL-60细胞为实验对象,通过加铁和去铁干预试验,探讨白血病细胞铁代谢及其调节机制以及IRP在HL-60细胞铁代谢中的作用.同时,探讨HL-60细胞中IRP、TfR和Fn与肿瘤基因WT1的关系;以揭示白血病细胞铁代谢机制以及铁在白血病发生发展中的作用.方法:按照实验要求,将FeCl或去铁胺(Desferrioxamine,DFO)加入含有10﹪胎牛血清的RPMI-1640培养
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