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该研究以人白血病细胞株HL-60细胞为实验对象,通过加铁和去铁干预试验,探讨白血病细胞铁代谢及其调节机制以及IRP<,2>在HL-60细胞铁代谢中的作用.同时,探讨HL-60细胞中IRP<,2>、TfR和Fn与肿瘤基因WT1的关系;以揭示白血病细胞铁代谢机制以及铁在白血病发生发展中的作用.方法:按照实验要求,将FeCl<,3>或去铁胺(Desferrioxamine,DFO)加入含有10﹪胎牛血清的RPMI-1640培养液中,使HL-60细胞处于缺铁或富铁的不同状态下进行培养.实验分为五组,即:FeCl<,3>-20组和FeCl<,3>-40组(培养液中FeCl<,3>终浓度分别为20、40μmol/L);DFO-50组和DFO-100组(培养液中DFO终浓度分别为50、100μmol/L);对照组(培养液中不加入FeCl<,3>和DFO).细胞培养后,分别于第12小时、24小时和48小时收集各组培养细胞,细胞总RNA的提取参照组织/细胞总RNA提取试剂盒要求进行,提取后液氮冻存.采用RT-PCR半定量法测定IRP<,2> mRNA、Fn mRNA、TfR mRNA和WT<,1>mRNA等指标的相对表达量.结论:1.铁剂和去铁胺是通过IRP<,2>或IRP<,2> mRNA对HL-60细胞的铁代谢产生作用.2.在该实验所用铁剂和去铁胺剂量范围内,铁剂和去铁胺对IRP<,2>mRNA表达的总量无影响.3.铁剂可能通过影响IRP<,2>的表达,调控TfR mRNA、Fn mRNA的合成,进而影响HL-60细胞TfR蛋白和Fn蛋白的表达量.4.DFO可能通过影响IRP<,2> mRNA不同片段的合成,调控TfR mRNA的表达,但对Fn mRNA的表达影响不大.5.IRP<,2> mRNA与TfR mRNA、Fn mRNA无相关关系.6.铁剂和去铁胺可能不影响HL-60细胞WT<,1> mRNA的表达.7.在HL-60细胞中,肿瘤基因WT<,1> mRNA与IRP<,2> mRNA、TfR mRNA、Fn mRNA无相关关系.