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血小板(platelet)是血液中运行着的微小颗粒成分之一，在止血、血栓形成、炎症反应、肿瘤生长与转移及器官移植后的排异反应中起重要作用。临床应用六味地黄方(LWDHF)治疗与预防的许多疾病中，如肾病、免疫性疾病、高血压、糖尿病及并发的血管病变、动脉粥样硬化、肿瘤等，血小板功能(粘附、聚集与释放)的异常是其共有的病理表现之一。本文依据该方的配伍规律，观察了全方(熟地：山茱萸：山药：泽泻：丹皮：茯苓为8：4：4：3：3：3组成)及其配伍“三补”方(熟地：山茱萸：山药为8：4：4)、“三泻”方(泽泻：丹皮：茯苓为3：3：3)、熟地/泽泻“药对”(8：3)、山茱萸/丹皮“药对”(4：3)及山药/茯苓“药对”(4：3)对肺动脉血栓形成模型小鼠致栓后恢复时间与血小板损失率的影响，及对模型大鼠、正常家兔血小板粘附功能、聚集功能、5-羟色胺(5-HT)的释放功能及血小板[Ca2]i的影响；并考察该方的配伍关系。
1.六味地黄方及其配伍对小鼠肺动脉血栓形成的影响：通过复制小鼠肺动脉血栓栓塞模型，观察六味地黄方全方及其配伍“三补”方、“三泻”方、熟地/泽泻、山茱萸/丹皮及山药/茯苓灌胃给药，对小鼠体内血栓形成后恢复时间及血小板损失率的影响。结果表明，全方27.0g生药kg-1、“三补”方17.28g生药-kg-1、“三泻”方9.72 g生药·kg-1、熟地/泽泻11.88 g生药-kg-1、山茱萸/丹皮7.56g生药·kg-1均能明显缩短小鼠肺栓塞后的恢复时间，降低致栓后血小板损失率；山药/茯苓在7.56g生药·kg-1时，无明显影响。提示该方具有抗体内血栓形成的作用，抗栓作用与降低血小板损失率正相关。依据作用的强弱顺序为全方>“三补*方>山茱萸/丹皮>熟地/泽泻>“三泻”方>山药/茯苓，提示该方起主要作用的配伍是山茱萸/丹皮、熟地/泽泻。
2.六味地黄方及其配伍对血小板粘附功能的影响：鉴于本方是治疗阴虚证的代表方剂，根据阴虚可以致血瘀的观点。以氢化可的松及肾上腺素复制阴虚血瘀证大鼠模型。全方(13.50 g·kg-1)、“三补”方(8.64 g·kg-1)、“三泻”方(4.86g·kg-1)、熟地/泽泻(5.94 g·kg-1)及山茱萸/丹皮(3.78 g·kg-1)灌胃给药时，均能明显降低模型大鼠的血小板粘附率，提示该方有抑制血小板的粘附的作用。按其降低血小板粘附率作用的强弱排列顺序为：全方>“三补”方>山茱萸/丹皮>熟地/泽泻>“三泻”方；该方抑制血小板粘附的作用以山茱萸/丹皮与熟地/泽泻贡献较大。
3.六味地黄方及其配伍对血小板聚集功能的影响：通过对正常家兔体外给药与阴虚血瘀证模型大鼠灌胃给药对不同诱导剂引起的血小板聚集率考察，结果表明：全方及其配伍均能不同程度降低血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集率，并存在明显的量效关系；根据IC50判断，由PAF、从、ADP诱导的IC50由大至小的排列顺序分别为：山药/茯苓>“三泻”方>全方>“三补”方>熟地/泽泻>山茱萸/丹皮(PAF)；山药/茯苓>“三泻”方>全方>熟地/泽泻>“三补”方>山茱萸/丹皮(AA)；山药/茯苓>“三泻”方>全方>熟地/泽泻>“三补”方>山茱萸/丹皮(ADP)。提示在相同剂量时，山药/茯苓对血小板聚集的抑制作用最弱，山茱萸/丹皮的作用最强。
阴虚血瘀证模型大鼠灌胃给药，造模方法与给药剂量如前所述。结果表明：全方及其配伍均能明显降低模型大鼠的血小板最大聚集率；按作用的强弱趋势排序：全方>山茱萸/丹皮>熟地/泽泻>“三补”方>“三泻”方。提示该方有抑制血小板聚集的作用，其配伍山茱萸/丹皮、熟地/泽泻起主要作用。
4.六味地黄方及其配伍对血小板5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)释放功能的影响：血小板激活后释放颗粒内的活性物质，进一步招募与激活血小板。通过定量检测5-HT含量，观察六味地黄方及其配伍体外给药对ADP激发的家兔血小板5-HT释放的影响。结果表明，在终浓度为18.52mg生药·ml-1时，全方及其配伍均能明显降低5-HT释放率。全方及其配伍的血小板5-HT释放率由低到高的顺序为：山茱萸/丹皮<“三补”方<熟地/泽泻<全方<“三泻”方<山药/茯苓。提示该方具有抑制血小板释放的作用；该方抑制血小板释放作用的趋势是山茱萸/丹皮最强，山药/茯苓最弱。
5.六味地黄方及其配伍对血小板[Ca2+]i的影响：Ca2+是血小板活化的信使物质。通过体外给药(终浓度为9.26 mg生药·ml-1)，以Fluo-3AM为Ca2+荧光探针，ADP为血小板激活剂，检测该方及其配伍对家兔血小板经ADP激活后[Ca2+]i释放的影响。结果表明，全方及其配伍，除山药/茯苓外，均有明显的降低血小板[Ca2+]i的作用。依据降低血小板经ADP激活后[Ca2+]i作用的强弱顺序为：山茱萸/丹皮>“三补”方>熟地/泽泻>全方>“三泻”方>山药/茯苓。提示抑制血小板[Ca2+]i释放是该方抑制血小板功能的机制之一。