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背景与目的恶性淋巴瘤是起源于淋巴及网状内皮系统的恶性肿瘤,分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma, HL)和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma, NHL),其中B型淋巴瘤占主要部分。CD20就是抗体工程药物治疗B系恶性淋巴瘤的一个理想靶点,因为CD20在B系淋巴瘤中表达广泛,并且能快速介导细胞内化。力达霉素(lidamycin, LDM)是烯乙二炔家族的一个新成员,作为一种大分子肽类抗生素,由辅基蛋白(LDP)和发色团(AE)组成,可以拆分和组装,并且具有较强的肿瘤杀伤活性,可作为抗体药物的高效“弹头”。本实验利用基因工程方法,将anti-CD20-Fab片段与力达霉素进行重组,形成强化融合蛋白anti-CD20(Fab)-LDM,靶向治疗B系恶性淋巴瘤。研究强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM体外对CD20表达阳性的淋巴瘤BJAB细胞增殖和DNA损伤的作用。方法流式细胞仪(FACS)检测融合蛋白抗CD20(Fab)-LDP与BJAB细胞的结合活性；激光共聚焦显微镜观察融合蛋白抗CD20(Fab)-LDP靶向结合BJAB细胞；MTT法检测强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM对BJAB细胞的生长抑制作用；单细胞凝胶电泳(single cell gel eletrophoresis, SCGE)检测强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM对DNA的损伤；流式技术检测强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM诱导BJAB细胞的细胞周期的改变。结果融合蛋白抗CD20(Fab)-LDP与BJAB细胞结合活性为阳性；激光共聚焦显微镜下观察,融合蛋白抗CD20(Fab)-LDP靶向结合在BJAB细胞表面；强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM作用于淋巴瘤BJAB细胞后,可以显著抑制BJAB细胞的生长,引起DNA损伤,诱导S期阻滞。结论强化融合蛋白抗CD20(Fab)-LDM可以靶向结合淋巴瘤BJAB细胞,并且具有显著的生长抑制作用,其作用机制是引起DNA的损伤。因此,我们认为抗CD20Fab-LDM基因工程抗体提供了一种治疗B细胞淋巴瘤特别是美罗华耐药的B细胞淋巴瘤的新方法。利用DNA重组和分子重建也为制作新型抗肿瘤药物提供了一个很好的技术平台。