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前言： 结直肠癌包括直肠癌和结肠癌，是一种常见的恶性肿瘤，在西方发达国家其发病率居恶性肿瘤第二位.随着生活水平的不断提高，饮食习惯的改变，我国结直肠癌的发病率也日渐增高.据预测，我国结直肠癌发病率与死亡率今后仍将逐步上升。寻找能够有效抑制肿瘤的生长与转移的靶点一直是肿瘤治疗的热点，但是，针对目前肿瘤相关靶点的靶向治疗仍然未得到让人满意的效果。 NOB1[NIN1/RPN12 binding protein1 homolog]是酵母基因Nob1p的人类同源基因，与细胞周期及转录调节有密切关系，其在C端和N端分别拥有一个保守的锌带结构域和一个具有RNA酶活性的PIN结构域。其编码的NOB1蛋白是一个多功能的蛋白质，在核糖体小亚基和26 S蛋白酶体的生物合成过程中发挥重要作用，而后两者的变化与肿瘤的发生、发展、转移和肿瘤生长抑制有关。 目的： 检测NOB1在结直肠癌中的表达，并探讨其表达与临床病理特征的关系。研究结直肠癌的发病机制，为防治该疾病提供依据。 方法： 1、研究对象 87例结直肠癌病理切片均取自中国医科大学附属盛京医院，其中男44例，女43例，平均年龄64岁(41～75岁)肿瘤部位:结肠36例，直肠51例。淋巴结转移29例，无淋巴结转移58例。Duck分期A期21例、B期37例、C期11例、D期18例，按照WHO大肠腺癌分化程度标准高分化17例，中分化49例，低分化组21例。18例息肉均为随机抽取病理证实为良性息肉样腺瘤。全部标本经病理检查确诊。所有患者术前未做任何放疗和化疗。 2、主要试剂 (1)兔抗人NOB1多克隆抗体（工作浓度为1∶80），购自美国ProteintechGroups。 (2) SABC免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中衫金桥生物技术有限公司。 3、免疫组织化学染色（SABC法） 蜡块连续切片，厚度4um。选取一张进行常规HE染色，确定组织学诊断及分化程度。检测NOB1在结直肠癌组织中的表达，操作严格按照试剂盒说明进行。DAB显色。采用SABC法对全部标本进行免疫组化染色，染色前用胰蛋白酶修复液进行抗原修复。用已知阳性组织切片作为阳性对照，以PBS替代一抗作为阴性对照。 4、结果判定 NOB1蛋白阳性表达为细胞质出现棕黄色颗粒，每例切片随机选取5个高倍镜(400)视野，根据每个视野中阳性细胞数占总上皮细胞数的百分比和染色深浅进行评分。阳性细胞数:＜25％为阴性，（0分）;26％-50％，（1分）;51％-75％，(2分);＞75％，（3分）。染色深浅:无染色记0分;弱染色记1分;中等强度染色记2分;强染色记3分。两者相乘得总分，根据总分结果将所有病例分为阴性(-)，0-1分;轻度阳性(+)，2-5分;强度阳性(++)，6-9分。 5、统计学处理 采用卡方检验进行统计处理，X2检验及精确概率法检验，差异有统计学意义，P＜0.05。 结果： 1、不同大肠组织NOB1的表达 NOB1蛋白在结直肠癌、结直肠良性息肉、正常结直肠肠黏膜中的阳性表达率分别为74.7％，44.4％和13.6％，结直肠癌NOB1蛋白的阳性表达率明显高于非癌组，P＜0.01 2、NOB1蛋白表达与结直肠癌临床病理学的关系 在结直肠癌组织细胞分化类型中低分化细胞癌NOB1蛋白表达最高90.4％，显著高于高分化腺癌47.1％，P＜0.05。 有淋巴结转移结直肠癌NOB1蛋白阳性率75.9％与无淋巴结转移组72.4％无统计学差别，P＞0.05; Duke分期A→D期结直肠癌NOB1蛋白表达阳性率分别为76.4％、78.4％、72.7％和72.2％无明显统计学差别，P＞0.05，; 讨论： NOB1作为一新近发现的肿瘤相关基因，国内外学者在不同肿瘤细胞中进行研究。L.Hong等最近的研究发现锌带蛋白与肿瘤多药耐药及胃肠恶性肿瘤的癌变基因相关并起作用，表明NOB1在调节一些生理和病理功能中也可能起着潜在的作用[17]。Lu等[18]利用siRNA沉默肝癌细胞株SMMC-7721中NOB1基因，结果显示NOB1的消除有效抑制了SMMC-7721细胞的生长和扩散。此外，在体内NOB1基因沉默的SMMC-7721细胞的肿瘤形成能力显著低于对照组。此研究提示NOB1是一个重要的调节人肝癌瘤性质的基因，可成为人类肝癌的治疗靶点。Lin等[19]通过RT-PCR技术对正常卵巢癌组织、良性肿瘤组织及卵巢癌组织中NOB1mRNA进行了检测，结果显示在卵巢癌组织中NOB1 mRNA特异性高表达，且与肿瘤大小、细胞分化程度即恶性程度存在显著相关性。并利用RNA干扰技术将NOB1 siRNA转染至卵巢癌细胞株SKOV3和HEY，发现其可有效抑制SKOV3、HEY细胞的生长活性、增殖能力，并将细胞周期阻滞在G0/G1期，提示NOB1可能与卵巢癌发生、发展相关。 本研究结果显示NOB1在结直肠癌中的表达明显高于其在正常大肠黏膜及息肉中的表达，NOB1蛋白表达水平与结直肠癌细胞分化程度呈正相关。提示NOB1可能在结直肠癌的发生、发展中起了一定的促进作用。本研究初步探讨了NOB1蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义，结果提示其可能与结直肠癌的发生，发展有关，关于其具体机制尚有待进一步的深入研究。 结论： 1、NOB1在结直肠癌中的阳性表达率明显高于非癌组（结直肠良性息肉和/或结直肠正常组织）. 2、NOB1蛋白表达水平的升高与结直肠癌细胞分化程度呈正相关，与淋巴结转移、Duke分期无明显统计学意义。