【摘 要】
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将柽柳(Tamarix. Sp)金属硫蛋白基因(MT1)插入到植物表达载体pBI121中,利用农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1基因导入烟草基因组,培育转基因烟草。转基因烟草T1
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将柽柳(Tamarix. Sp)金属硫蛋白基因(MT1)插入到植物表达载体pBI121中,利用农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1基因导入烟草基因组,培育转基因烟草。转基因烟草T1代植株的卡那霉素抗性分析表明,多数转基因植株后代表现为3:1的分离比例,少数转基因植株的抗性分离表现为15:1或不符合孟德尔遗传分离比例。说明整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基因,少数为多拷贝基因。对分离比为3:1的卡那霉素抗性植株进行PCR、PCR-Southern检测和Northern杂交分析证明:MT1基因已经整合到烟草基因组中,并且可以通过有性生殖传递给后代;外源MT1基因的转基因后代中能继续表达,但不同株系的外源基因表达水平不尽相同,T1-1和T1-6的外源基因表达量较高,T1-3和T1-8的外源基因表达量较低。分析非转基因烟草株系和4个转MT1基因烟草株系T1代在CdCl2和NaCl胁迫条件下,株高、鲜重、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量、叶绿素含量等生长性状和生理特性的变化情况表明:非转基因烟草株系和转MT1基因烟草株系在CdCl2和NaCl胁迫下,生长性状和生理特性表现出相似的变化趋势。但转基因植株的株高、鲜重、叶绿素含量、POD活性、SOD活性等均比非转基因株系明显增加;MDA含量比非转基因株系明显降低。用同样的方法将MT1导入杨树基因组中,对转基因杨树进行了PCR、PCR-Southern检测,初步证明MT1整合到杨树基因组中。
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