益肾养阴合剂对MRL/Ipr小鼠狼疮性肾炎的保护作用及部分机制研究

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目的:探讨益肾养阴合剂对肾功、肾脏病理变化及对P-STAT3表达的影响,揭示其发挥疗效的作用机制,并考查其安全性,为益肾养阴合剂治疗狼疮性肾炎(LN)提供理论依据。方法:1.两种种系相同不同品种的50只小鼠随机分5组:正常组C57BL/6J小鼠(0.9%生理盐水);MRL/1pr小鼠根据尿蛋白含量随机分为4组:模型组(0.9%生理盐水);中药组(益肾养阴合剂);中药联合激素组(益肾养阴合剂+醋酸泼尼松);激素组(醋酸泼尼松),每组10只,5只灌注取材,5只新鲜取材,连续给药四周后用western blot测定P-STAT3,用HE染色和免疫荧光染色观察肾脏病理变化,BCA蛋白浓度测定试剂盒测尿蛋白含量,比色法测定血肌酐、尿素氮。2.将20只C57BJ/6J小鼠随机分为对照组、中药组,予小鼠最大给药量灌胃14天,观察一般情况、体重,酶标法测定谷丙转氨酶、谷草转氨酶,比色法测定血肌酐、尿素氮。结果:1.MRL/lpr小鼠尿蛋白含量均有明显升高(p<0.05),差异有显著性意义。中药组第1、2周尿蛋白无明显变化(p>0.05),第3、4周时尿蛋白明显降低(p<0.05)。中药联合激素组、激素组,第2、3、4周尿蛋白逐渐降低(p<0.05)。在给药第一周,与模型组相比,尿蛋白含量在各治疗组之间无明显差异(p>0.05)。在第2、3、4周时,与模型组相比,各治疗组的尿蛋白含量均有显著下降(p<0.05),中药联合激素组的尿蛋白含量最低(p<0.05)。血肌酐、尿素氮各治疗组均有显著下降(p<0.05),中药联合激素组下降最明显(p<0.05)。给药处理后,p-stat3的表达均呈下降趋势,中药组、激素组的p-stat3表达相比模型组有所减少(p<0.05);中药联合激素组的降低情况最为显著(p<0.05),而激素组的p-stat3表达比中药组的高(p<0.05)。HE染色三个治疗组肾组织局部轻度系膜细胞增生,肾小球炎症细胞浸润减少,lgG免疫荧光染色三个治疗组肾组织中有lgG沉积,但比模型组少。2.小鼠的最大灌胃体积量相当于临床成人(体重按70kg计)拟用量的120.34倍。小鼠体重、肝肾功各组比较无统计学意义(p>0.05)。结论:1.益肾养阴合剂能改善MRL/lpr小鼠的肾功能及肾脏病理,且联合激素肾功能改善更明显。2.下调磷酸化的STAT3的表达可能是益肾养阴合剂治疗狼疮性肾炎的作用靶点之一。3.益肾养阴合剂急性毒理实验对小鼠体重、肝肾功能等未见明显异常,短期服用较安全,但仍需进一步研究。
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