论文部分内容阅读
本文研究目的:利用动物辐射模型筛选补中益气丸、四物汤等中药复方的辐射防护作用,并进一步在细胞水平上确认有效中药复方的有效成分并探讨其辐射防护作用机制。
研究方法:
1.以3.5Gy或4.0Gy剂量的60Coγ射线照射小鼠造成造血系统的损伤,以外周血白细胞数作为筛选的主要指标;以8.0Gy剂量的60Coγ射线照射小鼠,用30d活存率经典指标验证筛选结果;进一步观察有效中成药补中益气丸对小鼠的抗氧化能力及造血功能的影响。
2.用剂量为2Gy的60Coγ射线照射v79细胞,用经典的克隆形成法检测四物汤及其主要单体的辐射防护作用,以确认四物汤的辐射防护作用有效成分并探讨其机制。
研究结果:
1.动物水平筛选结果显示补中益气丸和绿谷灵芝能够促进受照小鼠白细胞计数恢复,用30d活存率指标验证,两者分别能提高受照小鼠活存率30%和40%,补中益气丸提高受照小鼠活存率高于绿谷灵芝10%;四物合剂能够提高受照小鼠活存率30%。小鼠受照后,外周血清中的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量升高,超氧化物歧化酶(SOD)的活性降低,补中益气丸与照射对照组比降低受照小鼠外周血清中的MDA含量(p<0.05),对SOD的活性有升高趋势,且能增加反映造血干细胞相对数量的脾结节数,对小鼠照射后引起的脾细胞和胸腺细胞凋亡率升高和细胞周期的变化无显著影响。
2.在v79细胞模型上,克隆形成法结果表明补中益气汤和四物汤对正常细胞在较高浓度1250μg/m1时无毒性。四物汤中主要单体果糖对v79细胞有明显的辐射防护作用,其他单体无防护作用。果糖在浓度为10μg/ml时与照射对照组比显著提高细胞活存率11%,并在250μg/ml时有最高的活存率24%,其防护作用有一定的剂量依赖关系,且在照射前和照射后给药均有保护作用,MTS法和台酚蓝排斥法两种方法与克隆形成法的结果相似。250μg/mL的果糖在照后24h与照射组相比对照射引起的SOD活性和CAT活性降低有进一步显著降低的作用,在照后48h对SOD活性有显著的促进作用,对CAT活性无显著影响。对照射引起的v79细胞内ROS水平升高无影响。
研究结论:
1.补中益气丸对受照小鼠有较好的辐射防护作用,并且其保护作用与其抗氧化、促进照射后造血功能恢复及对细胞凋亡和周期变化无影响有关。
2.四物汤中主要单体果糖对v79细胞有防护作用,其机制与果糖对抗氧化酶比例的调节有关,可能与其参与能量代谢无关。果糖对细胞的辐射防护作用尚未见国内外文献报道。