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单胺氧化酶（Monoamine oxidase, MAO）是一种存在于细胞线粒体外膜的黄素蛋白酶，可分为 MAO-A和 MAO-B两种亚型。其生理作用主要是催化内源性和外源性单胺递质的脱氢氧化，与去甲肾上腺素（Norepinephrine, NE）、5-羟色胺（5-Hydroxytryptamine,5-HT）和多巴胺（Dopamine,DA）的含量紧密相关。当MAO活性异常升高时可使单胺类递质紊乱，导致神经系统类疾病，如抑郁症（Depression, DEP）、帕金森病（Parkinsons disease, PD）和阿尔茨海默病（Alzheimers disease, AD）等。在临床上，已用MAO抑制剂（Monoamine oxidase inhibitor, MAOI）抑制异常升高的 MAO活性，其中 MAO-A抑制剂（Monoamine oxidase-A inhibitor, MAO-AI）主要用于治疗抑郁症；MAO-B抑制剂（Monoamine oxidase-B inhibitor, MAO-BI）主要用于治疗PD和AD。在MAO-B抑制剂中，雷沙吉兰可选择性抑制MAO-B，减少 DA代谢，延长 DA的作用时间，改善帕金森行为能力，并具有神经元保护作用和延缓病程的发展，但是雷沙吉兰仍然伴有体位性低血压、头痛、心动过速以及呕吐等严重的不良反应。为此，设计筛选高效低毒的MAO-B抑制剂，对于缓解PD病情，改善PD患者身体健康及生活质量仍然是目前的研究热点之一。本课题拟建立一种快速、灵敏的MAO活性测定方法，用于MAO抑制剂的高通量筛选，并初步研究新设计合成的 MAO抑制剂（PPA14-R、PPA14-S和 PPA14）对MAO活性的作用以及在PD模型小鼠作用中的构效关系，其主要工作和结果如下： 1.成功建立了一种简单、快速、灵敏和环保的DNPH分光光度法。该方法以苄胺和5-HT分别作为MAO-B和MAO-A的底物，以2，4-二硝基苯肼（2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH）为衍生试剂，经实验确定其最佳条件为：在磷酸钾缓冲液（25 mmol/L, pH7.60）条件下，于37 ℃，酶预孵育20 min，按苄胺（0.016 mol/L）或5-HT（0.02 mol/L）与MAO混悬液（4.69μg/μL）体积比（1:1）加200μL，催化反应60 min后加400μL DNPH，衍生化反应40 min后2 mLNaOH，5 min后分别于465 nm和425 nm波长处测定MAO-B和MAO-A的活性。 2.采用DNPH分光光度方法，测得雷沙吉兰对SD大鼠脑MAO-B和MAO-A活性抑制作用的IC50值分别为8.00×10-9 mol/L和2.59×10-7 mol/L，与文献报道[1]IC50值（MAO-B:4.43±0.92×10-9 mol/L;MAO-A:4.12±1.23×10-7 mol/L）具有相同数量级，这表明该方法具有较好的可靠性。 3.在体外实验中，以雷沙吉兰作对照，新设计合成的 MAO抑制剂（PPA14-R、PPA14-S和PPA14）对MAO-B具有很好的抑制作用和选择性，其中PPA14-R对MAO-B的抑制作用最强，这些化合物与雷沙吉兰的作用相似。 4.在以MPTP诱导PD亚急性模型小鼠中，以雷沙吉兰作对照，新设计合成的MAO抑制剂（PPA14-R、PPA14-S和PPA14）连续治疗14天，结果表明PPA14-R、PPA14-S和PPA14与雷沙吉兰的作用相似，均选择性抑制肝MAO-B，可缓解PD小鼠的行为障碍并具有一定的神经元保护作用，其中PPA14-R对脑MAO-B和MAO-A的抑制作用、行为改善能力和神经元保护作用较其他化合物强，且略强于雷沙吉兰。 综上所述，构建的DNPH分光光度法，具有简单、快速、灵敏和环保的特点，并能较好用于体内外MAO活性的研究，其实验结果表明新设计合成的MAO抑制剂（PPA14-R、PPA14-S和PPA14）与雷沙吉兰相似，均对MAO-B具有较好的选择性，可改善PD模型小鼠的行为障碍，且具有一定的神经元保护作用，其中PPA14-R的作用最强，且略强于雷沙吉兰，这表明该MAO抑制剂有进一步研究的价值。