艾灸治疗克罗恩病效应及其机理的实验研究

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目的:探讨艾灸治疗克罗恩病的效应及其机制。   方法:本研究在成功建立克罗恩病模型大鼠的基础上,分三个部分开展相关实验研究。   1、实验一:将45只大鼠分为正常组、模型组、温和灸组、隔药灸组和西药组(柳氮磺胺吡啶溶液灌胃)5组,分组处理14日后,分别观察各组大鼠结肠组织病理学变化和检测大鼠结肠黏膜TNF-α、TNFR1、TNFR2含量。   2、实验二:将40只大鼠分为正常组、模型组、艾灸组、艾灸加色甘酸钠穴位注射组,分组处理14日后,分别观察各组大鼠结肠组织病理学变化和穴区肥大细胞形态、检测穴区肥大细胞脱颗粒率。   3、实验三:将32只大鼠分为正常组、模型组、艾灸A组(43℃/5min)、艾灸B组(43℃/10min),分组处理14日后,分别观察各组大鼠结肠组织病理学变化;计算脾和胸腺重量指数;观察脾脏组织增殖细胞核抗原PCNA表达;检测血清IgG、IgA、IgM水平和结肠黏膜IL-4、IL-10、IL-12、INF-γ mRNA表达以及穴区组织肥大细胞脱颗粒数。   结果:   1、实验一:克罗恩病模型大鼠结肠黏膜TNF-α、TNFR1、TNFR2含量较正常组均显著增高(P<0.01),肠道炎症明显,并有肠道纤维化和肉芽肿形成,提示TNF-α在介导CD肠道炎症和肠纤维化过程中起着重要作用。隔药灸、温和灸均能不同程度地降低结肠黏膜TNF-α、TNFR1、TNFR2含量(P<0.01),改善肠道炎性反应。   2、实验二:艾灸组大鼠结肠病理学观察结果明显优于艾灸加色甘酸钠注射组,艾灸组的穴区肥大细胞脱颗粒率较其它各组明显提高(P<0.05),而艾灸+色甘酸钠组则低于单纯的艾灸组(P<0.05)。说明穴区注射色甘酸钠后抑制了肥大细胞脱颗粒,而穴区肥大细胞脱颗粒的减少消弱了艾灸的治疗效果。   3、实验三:CD模型大鼠脾和胸腺重量指数以及脾脏组织增殖细胞核抗原PCNA表达明显增高(P<0.01);血清IgG、IgA、IgM水平和结肠黏膜IL-12、IFN-γ mRNA表达上升(P<0.01);结肠黏膜IL-4、IL-10 mRNA表达下降(P<0.01)。艾灸可显著促进穴区肥大细胞脱颗粒(P<0.01);降低脾和胸腺重量指数以及脾脏组织增殖细胞核抗原PCNA表达(P<0.01);降低血清IgG、IgA、IgM水平(P<0.01);调节结肠黏膜IL-12、IFN-γ mRNA、IL-4、IL-10 mRNA表达(P<0.01)。艾灸A组(43℃/10min)效应优于艾灸B组(43℃/5min)   结论:   艾灸可通过诱导穴区肥大细胞脱颗粒发挥对克罗恩病模型大鼠免疫功能的调节作用,显著改善克罗恩病模型大鼠免疫异常反应,减轻克罗恩病结肠组织炎性病变,且灸量与艾灸效应密切相关,43℃/10min的艾灸效应优于43℃/5min艾灸效应。
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