【摘 要】
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鸭病毒性肠炎（Duck viral enteritis,DVE）,又名鸭瘟（Duck plague,DP）是由鸭肠炎病毒（DEV,Duck enteritis virus）引起的鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病,其特
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鸭病毒性肠炎（Duck viral enteritis,DVE）,又名鸭瘟（Duck plague,DP）是由鸭肠炎病毒（DEV,Duck enteritis virus）引起的鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传染病,其特征是流行广泛,传播迅速,发病率和死亡率高。鸭肠炎病毒属于疱疹病毒科,未分类病毒属。DEV分子生物学研究落后于其它疱疹病毒,目前其基因组结构和物理图谱尚属未知。本研究围绕DEV U ul45和ul47基因,对其功能进行了初步研究。DEV UL45和UL47编码外膜蛋白,目前未见有对其功能研究的报道。HSV-1 UL45蛋白在病毒诱导的细胞与细胞间的融合过程中起关键作用;PrV UL47蛋白对病毒在细胞质中的组装过程中起重要作用。BHV-1 UL47蛋白是BHV-1病毒颗粒重要的结构蛋白。本研究参照GenBank上发表的基因序列（序列号为EF153413）,设计克隆ul45亲水区68aa的引物p1/p2,克隆UL47 ORF引物p3/p4;以DEV核酸为模板克隆ul45（68aa）与ul47基因。构建重组质粒pMD18-T-UL ul45（68aa）和pMD18-T- ul47之后,构建了原核重组表达质粒pGEX-6p- ul45（68aa）和pET30a- ul47,将阳性重组质粒转化表达受体菌Rosetta感受态细胞中,经IPTG诱导表达,均获得原核表达蛋白。将原核表达的蛋白进行纯化,免疫家兔,制备多克隆抗体,测得兔抗UL45（68aa）和UL47多克隆抗体的琼扩效价分别为1:8和1:16。利用间接免疫荧光实验进行UL45和UL47蛋白在感染细胞中的定位,结果表明,DEV UL45蛋白主要定位于感染细胞的细胞核和细胞质;DEV UL47蛋白主要定位于感染细胞的细胞质和细胞膜。噬斑减数中和实验表明,UL45（68aa）抗血清对DEV没有中和活性;UL47抗血清对DEV有中和活性,中和抗体滴度为1:25。UL45和UL47作为15种外膜蛋白的2种,对其功能的研究能使我们在蛋白水平上加深对DEV的认识。
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