【摘 要】
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严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,SARS)是一种新出现的突发性传染性疾病,其病原体为新型冠状病毒,命名为SARS相关冠状病毒(SARS-associated coronavir
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严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,SARS)是一种新出现的突发性传染性疾病,其病原体为新型冠状病毒,命名为SARS相关冠状病毒(SARS-associated coronavirus,SARS-CoV)。该病毒有四种结构蛋白,包括spike(S)蛋白、envelope(E)蛋白和membrane(M)蛋白三种膜蛋白和nucleocapsid(N)核心蛋白。S蛋白是病毒颗粒最大的结构蛋白和最重要的病毒表面抗原,已知关于其他冠状病毒和SARS-CoV的研究均表明S蛋白是病毒颗粒与受体结合的媒介分子,也是病毒中和性抗体结合的靶点,在病毒治疗和疫苗研究中起着重要作用。该蛋白属于Ⅰ型膜蛋白,由1255个氨基酸组成,共有24个糖基化位点。根据功能划分,S蛋白可分成两部分:膜外的S1区(形成S蛋白的球形部分)和穿膜的S2区(形成穿膜棒状结构)。在这两个不同的结构域中,S1区结合受体细胞表面,目前已被确认受体结合的功能区是在S蛋白N端318～510 aa之间。 SARS是由一种新出现的冠状病毒引起的,目前对SARS-CoV的致病机理和生物学特征等方面了解甚少。而S蛋白与病毒侵入人体过程关系密切,而且研究证明S蛋白的变异对SARS-CoV病毒株的毒力有很大影响,因此,克隆S蛋白尤其是S1区对SARS-CoV的生物学功能研究、血清流行病学调查以及研制基因工程备选疫苗均具有重要意义。制备抗S蛋白S1区单克隆抗体可能为SARS的特异性治疗提供新的研究材料,同时也可在获得S蛋白单抗的基础上建立SARS-CoV抗原检测方法,为SARS早期诊断提供新方法。 本课题旨在原核克隆表达S蛋白S1区基因及其片段,并在获得的具有免疫原性蛋白的基础上免疫小鼠制备抗S蛋白鼠源性单克隆抗体,建立检测S蛋白
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