阴虚动风证帕金森病模型大鼠氨基酸变化的研究

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目的:  观察阴虚动风证帕金森病模型大鼠神经行为学、氧化应激、氨基酸含量变化及复方地黄方的干预作用,以期揭示帕金森病阴虚动风证的证候本质。  方法:  采用经典、公认的6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)脑部单侧注射损毁黑质制备帕金森病大鼠模型,并以此基础上制备阴虚动风证帕金森病模型大鼠。并在4、6周两个时间点观察大鼠神经行为学变化,通过应用比色法检测大鼠纹状体内SOD、MDA、GSH、GSH-Px含量的变化,并通过高效液相色谱方法检测大鼠损毁侧纹状体内氨基酸含量的变化;根据“方证相应”原理观察中药复方地黄方对模型大鼠各项指标的干预作用。  结果:  (1)神经行为学结果:正常对照组、假手术组的大鼠均没有旋转行为,阴虚动风证帕PD模型组和复方地黄方组予以腹腔注射APO0.5 mg/kg后均出现了旋转行为,其中阴虚动风证PD模型组随造模时间的延长,其旋转圈数呈增加趋势;复方地黄方干预后随治疗时间的延长,其旋转圈数呈减低趋势。(2)氧化应激指标结果:阴虚动风证PD模型大鼠的纹状体内的SOD、GSH、GSH-Px的含量对比正常对照组、假手术组均减少,且随着造模时间延长,其减少态势越趋明显,相反MDA的含量比正常对照组、假手术组增加,并随着造模时间延长,其增加的态势越趋明显;基于“方证相应”原理结果揭示:复方地黄方能够明显提高SOD、GSH、GSH-Px的含量,并且随着用药时间的延长呈现增加的趋势,同时能够降低MDA的含量,并且随着用药时间的延长而呈现减少的趋势。(3)氨基酸含量检测结果:阴虚动风证PD模型组天冬氨酸、谷氨酸等兴奋性氨基酸的含量比正常对照组、假手术组增加,且随着造模时间的延长呈上升趋势,其中谷氨酸含量的增加趋势更加明显;抑制性氨基酸中的甘氨酸的含量随着造模时间延长呈增加趋势,而γ-氨基丁酸含量则呈减少趋势;阴虚动风证PD模型组的Glu/GABA比值比正常对照组、假手术组升高,且随着造模时间延长呈上升趋势。“方证相应”实验显示:复方地黄方干预后兴奋性氨基酸的含量减少,且谷氨酸含量的减少趋势更加明显;抑制性氨基酸中的γ-氨基丁酸含量升高,甘氨酸含量则无明显变化。复方地黄方干预后Glu/GABA比值呈现降低的趋势。  结论:  氧化应激是阴虚动风证帕金森病的发病机制之一。氨基酸与帕金森病模型大鼠阴虚动风证具有明显的相关性;复方地黄方能够改善神经行为学表现和氧化应激反应,主要通过降低谷氨酸等兴奋性氨基酸毒性作用,促进γ-氨基丁酸等抑制性氨基酸的合成,以此调节兴奋性和抑制性氨基酸的失衡状态,起到缓解阴虚动风证帕金森病的作用。
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