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目的:评价病毒特异抗体Ig-M测定在病毒性脑炎诊断中的意义。期望寻找一种理想的病毒性脑炎的病原学诊断方法,来提高病毒性脑炎的诊断水平,为病毒性脑炎的临床治疗和发病机制研究提供依据。
方法:临床诊断为病毒性脑炎的患者48例,入院3天内留取血清和脑脊液标本。所有标本冻存于-70℃低温冰箱,分批进行检测。用美国ADL公司提供的ELISA试剂盒,定量检测标本中三种病毒特异性抗体Ig-M的相对浓度。实验中,血清及脑脊液标本均用稀释液1:1稀释；通过六个标准液绘制标准曲线,标本酶标检测结果代入标准曲线计算相关病毒特异性抗体Ig-M的浓度。实验中检测单纯疱疹病毒1型(HSV-1),巨细胞病毒(HCMV),柯萨奇病毒(CBV)；通过病毒抗体Ig-M浓度及阳性率的测定建立病毒性脑炎的病原学诊断。实验设立非中枢神经系统感染疾病患者40例(多发性硬化10例,吉兰.巴雷综合征20例,脑囊虫5例,神经官能症3例,良性高颅压综合征2例)为对照组。对两组患者病毒抗体的浓度及阳性率进行比较,来评价病毒抗体Ig-M测定作为病原学诊断的意义。观察病脑组患者的脑脊液细胞学特点。统计学分析采用SPSS12.0软件,计量资料采用t检验(或秩和检验),计数资料采用x2检验,检验水准α=0.05。
结果:
1在研究组48例中,通过血清中病毒性脑炎抗体Ig-M测定诊断为单纯疱疹病毒性脑炎的13例(27.08％),巨细胞病毒性脑炎11例(22.92％),柯萨奇病毒性脑炎7例(14.58％)。通过脑脊液中病毒性脑炎抗体Ig-M测定诊断为单纯疱疹病毒性脑炎的7例(14.58％),巨细胞病毒性脑炎6例(12.50％),柯萨奇病毒性脑炎3例(6.25％)。对照40例中有1例临床诊断为吉兰-巴雷综合征,但单纯疱疹病毒抗体检测为阳性；3例分别诊断为多发性硬化、吉兰-巴雷综合征、脑囊虫,但巨细胞病毒抗体检测为阳性。在研究组中有1例出现单纯疱疹病毒抗体和巨细胞病毒抗体重叠出现阳性的现象。在血清病毒特异抗体Ig-M的测定中发现:对于单纯疱病毒特异抗体Ig-M的测定,病例组与对照组在浓度及阳性率的比较上均有统计学意义(p值分别为0.0002和0.0017);对于巨细胞病毒抗体的测定,病例组与对照组在浓度及阳性率的比较上有统计学意义(p值分别为0.0073和0.0183);对于柯萨奇病毒抗体的测定,病例组与对照组在浓度的比较上有统计学意义(p=0.0173),在阳性率的比较上无统计学意义(p=0.1116)。
在脑脊液病毒特异抗体Ig-M的测定中发现:对于单疱病毒特异抗体Ig-M的测定,病例组与对照组在浓度及阳性率的比较上均有统计学意义(p值分别为0.0001和0.0339)；对于巨细胞病毒特异抗体的测定,病例组与对照组在浓度的比较上有统计学意义(p=0.0001),在阳性率的比较上无统计学意义(p=0.0585)；对于柯萨奇病毒特异抗体的测定,病例组与对照组在浓度及阳性率的比较上均无统计学意义(p值分别为0.4404和0.3082)。
2在研究组中,对于三种病毒特异抗体Ig-M的测定,血清的测定中互相比较无统计学意义(p=0.3163);脑脊液的测定中互相比较无统计学意义(p=0.4009)。
3记录血清及脑脊液中测定病毒特异性抗体Ig-M的阳性标本数,结果中有一种病毒抗体阳性即记录为该标本阳性,所有病毒抗体阴性方记录为阴性,每位患者任一标本病毒抗体阳性即为该患者病原学检测阳性。血清中测定的总阳性数为31,占64.58％,脑脊液中测定的总阳性数为16,占33.33％,任何一种标本中阳性即记为总阳性,为42个,占87.50％。三组两两比较有统计学意义。
4将研究组48例患者,按留取标本时间早晚分为两组:在10天之内的为急性期组,共32例；在10天之后的为亚急性期组,共16例。两组在浓度及阳性率的比较上有明显的统计学意义(p=0.0024)。
5将研究组48例患者,按脑脊液细胞学分类分为三组:其中以淋巴细胞反应为主的构成比为54.17％,以嗜中性粒细胞反应为主的占12.50％,完全正常的占33.33％。
结论:
1应用脑脊液常规、生化、细胞学等检测可对病脑患者进行临床诊断和鉴别诊断。
2应用特异性抗体Ig-M检测方法简单迅速,可对病毒性脑炎进行早期病原学诊断,有一定价值。
3我们将继续扩大病例,继续探索病毒特异性抗体在病毒性脑炎中的诊断价值。
4血与脑脊液联合应用,在病毒性脑炎的诊断中有互补的意义。
5在发病的不同时间选择不同的抗体更有意义,早期选择Ig-M,晚期选择Ig—G,对病毒性脑炎的诊断可能更有价值。