花生(Arachis hypogaea L.)种子发育中期的表达序列标签分析

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种子蛋白是世界粮食中植物性蛋白的重要来源。种子发育中除大量积累贮藏蛋白、抗性蛋白外,还合成大量信号蛋白,转录因子。 表达序列标签(expressed sequence tag,EST)技术是分析基因表达和克隆新基因的有效方法。发育中期花生子叶的2547条EST序列被克隆,同源性分析表明2059(79.4﹪)的EST属于已知功能的基因,根据其功能分为11类基因。其中,可能的贮藏蛋白EST序列有461条,占全部EST序列的18.1﹪;可能的抗性基因EST序列有207条,占全部EST序列的8.1﹪;可能的信号蛋白EST序列有140条,占全部EST序列的5.5﹪;可能的转录因子EST序列有65条,占全部EST序列的2.6﹪;无明显相似性的EST序列有268条,占全部EST序列的10.5﹪。 2547条EST序列的有效阅读序列有953353bp,平均每条EST的有效阅读序列有374bp,共有单基因1753个。单个拷贝基因数有1511个,而两个或多个拷贝数的单基因只有242个,这242个单基因占总EST序列的42.5﹪。 在2547条EST序列中,拷贝数超过15的基因有Conglutin 2、Ara 1、Conglutin 5、Conglutin 1、Conglutin 3、Ara 2、.Ara 3、Ahoie 17.8、Ahole14.3、Ahyα和Ahole 14.4,全部属于花生贮藏蛋白。 利用EST技术,分离到花生Arachin基因两个:Ara6,Ara 7和conglutin基因AhCON6 1,.AhCONG 8两个。另外还发现三个花生蛋白酶抑制剂分别命名为AhIBB A2,.AhIBB B2和AhIBB B4;两个1lS豆球蛋白Legumin B,分别命名为AhLEG B1、A.hLE6 B2。
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