【摘 要】
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本文以牦牛肝为研究对象，采用磷酸缓冲溶液提取法从新鲜牦牛肝中提取牦牛肝蛋白并进行制备以及抗肝癌活性研究。利用pH7.2的磷酸缓冲溶液进行提取，经DEAE-52液相制备分离系统制
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本文以牦牛肝为研究对象，采用磷酸缓冲溶液提取法从新鲜牦牛肝中提取牦牛肝蛋白并进行制备以及抗肝癌活性研究。利用pH7.2的磷酸缓冲溶液进行提取，经DEAE-52液相制备分离系统制备，通过建立H22荷瘤小鼠动物模型，测定肿瘤抑瘤率、体重、肿瘤体积、免疫指数和血清中白细胞介素-2（IL-2）及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平，以及对肿瘤组织进行切片经HE染色观察以确定牦牛肝蛋白的抗肿瘤作用。 本研究主要内容包括：⑴从新鲜牦牛肝中提取粗蛋白平均提取率为23.66％，制备BGP1得率为5.60％。⑵制备所得蛋白经SDS-PAGE进行分子量鉴定，其分子量在60000-70000Da之间，制备获得BGP130g。⑶低、中、高剂量BGP1（100mg/kg/d、200mg/kg/d和300mg/kg/d）对小鼠H22肿瘤生长抑制率分别为50.15％、59.20％、73.35％，其抑制率随剂量的增加而上升，呈明显的剂量依赖性。⑷BGP1给药组与模型组对照，小鼠脾指数显著升高，胸腺指数显著降低;阳性对照(CTX)组胸腺指数、脾指数均显著下降;BGP1给药组H22小鼠血清中IL-2水平显著升高;低剂量BGP1组TNF-α水平明显升高，中高剂量变化不明显。⑸肿瘤组织的病理切片结果:模型组细胞排列较密集，体积大小不一，有的呈侵袭性生长，有坏死;阳性对照组肿瘤呈弥漫性分布，肿瘤细胞细胞核固缩，出现大片坏死;BGP1低剂量组肿瘤细胞核固缩，变小，胞浆少，坏死显著，BGP1中高剂量组出现片状坏死，细胞间质淋巴细胞浸润，数量明显增多。
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