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维生素E是一种重要的免疫增强剂,具有提高机体免疫机能、抗氧化、抗癌、促进生殖生产能力等作用,广泛应用于食品抗氧化剂、营养增补剂、医药、化妆品等方面。但由于其自身脂溶性,人体吸收时需要胆汁酸和油脂的参与,因而在食品行业中的应用受到很大限制。作为维生素E活性最强的水溶性衍生物,聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)能够很好地解决这一问题,在国外现已广泛用作增溶剂、增塑剂、乳化剂、吸收促进剂及难溶性药物传递系统的载体,从而大大提高了人体吸收率。本课题采用新型VE营养补充剂TPGS建立动物模型,根据健康成人的每日VE推荐膳食摄入量15mg/60kg,按其等效剂量的1倍、5倍、10倍和20倍分别设立B、C、D、E四个剂量组,并同时设立A组为对照组。通过流式细胞术检测T淋巴细胞亚群实验、血清溶血素实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、琼脂糖凝胶电泳检测胸腺细胞凋亡实验,并同时检测体重和脏器指数,从而从生长状况、免疫器官发育、细胞免疫功能、体液免疫功能、非特异性免疫功能及免疫细胞凋亡六个角度全面探讨TPGS对小鼠免疫功能的影响,为确定TPGS作为免疫增强剂的最适补充剂量提供充分的理论依据。
研究结果如下:(1)给药30天后,各组小鼠体重、胸腺指数及脾脏指数均与对照组无显著差异(P>0.05)。(2) TPGS对小鼠CD4~+T(％)具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量时,CD4~+T(％)不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时,CD4~+T(％)虽有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,CD4~+T(％)则显著低于对照组(P<0.05)。各给药组CD8~+T(％)均比对照组有所提高,但无显著差异(P>0.05)。CD4~+T/CD8~+T在1倍~10倍需要量时均比对照组有所提高,在5倍需要量时达到峰值,且具有显著性(P<0.05);当浓度增至20倍需要量时,比值低于对照组,呈现抑制效应,但并不显著(P>0.05)。(3) TPGS对小鼠血清溶血素含量具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量,血清溶血素含量不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,则呈现显著的抑制作用(P<0.05)。(4) TPGS对小鼠巨噬细胞吞噬率具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量时,吞噬率不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时,吞噬率有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,则呈现显著的抑制作用(P<0.05)。吞噬指数的变化趋势与吞噬率一致。(5)采用琼脂糖凝胶电泳检测胸腺细胞凋亡片段,与阳性对照组相比,各给药组DNALadder均有所减弱,5倍需要量减弱最为明显,1倍需要量次之,10倍和20倍需要量则与阳性对照组差异不大。
本研究的实验结果表明,补充TPGS对小鼠体重和脏器指数无显著影响,但能不同程度地增强小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能和非特异性免疫功能,同时对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡有显著的抑制作用。TPGS的免疫调节作用与其剂量密切相关,是一种剂量依赖性的双向调节作用,作为一种安全有效的免疫增强剂,TPGS的最适补充剂量为5倍需要量1.25mg/kg·d。
研究结果如下:(1)给药30天后,各组小鼠体重、胸腺指数及脾脏指数均与对照组无显著差异(P>0.05)。(2) TPGS对小鼠CD4~+T(％)具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量时,CD4~+T(％)不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时,CD4~+T(％)虽有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,CD4~+T(％)则显著低于对照组(P<0.05)。各给药组CD8~+T(％)均比对照组有所提高,但无显著差异(P>0.05)。CD4~+T/CD8~+T在1倍~10倍需要量时均比对照组有所提高,在5倍需要量时达到峰值,且具有显著性(P<0.05);当浓度增至20倍需要量时,比值低于对照组,呈现抑制效应,但并不显著(P>0.05)。(3) TPGS对小鼠血清溶血素含量具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量,血清溶血素含量不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,则呈现显著的抑制作用(P<0.05)。(4) TPGS对小鼠巨噬细胞吞噬率具有剂量依赖性的双向免疫调节作用,即在1倍需要量和5倍需要量时,吞噬率不断提高,均极显著高于对照组(P<0.01);当浓度增至10倍需要量时,吞噬率有所下降,但仍略高于对照组(P>0.05);而当浓度增至20倍需要量时,则呈现显著的抑制作用(P<0.05)。吞噬指数的变化趋势与吞噬率一致。(5)采用琼脂糖凝胶电泳检测胸腺细胞凋亡片段,与阳性对照组相比,各给药组DNALadder均有所减弱,5倍需要量减弱最为明显,1倍需要量次之,10倍和20倍需要量则与阳性对照组差异不大。
本研究的实验结果表明,补充TPGS对小鼠体重和脏器指数无显著影响,但能不同程度地增强小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能和非特异性免疫功能,同时对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡有显著的抑制作用。TPGS的免疫调节作用与其剂量密切相关,是一种剂量依赖性的双向调节作用,作为一种安全有效的免疫增强剂,TPGS的最适补充剂量为5倍需要量1.25mg/kg·d。