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猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的新传染病。临床上以妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。PRRSV属动脉炎病毒科,系单股正链RNA病毒,基因组大小为15kb,包括8个开放阅读框,可编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白,其中ORF5编码病毒的糖基化包膜蛋白(GP5蛋白,又称E蛋白),是主要的结构蛋白,也是一种多功能蛋白,参与细胞免疫与体液免疫；ORF6编码基质蛋白(又称M蛋白),为非糖基化蛋白。由0RF6、ORF5分别编码的M、E蛋白是PRRSV是病毒的主要结构蛋白,它们在病毒的致病性、病毒复制、病毒装配、病毒变异和保护性反应等方面可能具有重要意义,是发展新型疫苗的良好目标基因。杆状病毒表达载体系统(baculovirus expression vector system, BEVS)被广泛应用于重组蛋白的表达,并且已经成功表达了大量的蛋白质。该系统表达有着独特的优势,比如,在大肠杆菌中不能表达的真核生物蛋白,都能在BEVS中表达。而且该系统还可以在昆虫细胞中对重组蛋白进行翻译后的加工修饰,使表达的真核蛋白具有与天然产物几乎相同的生物活性。最近,研究人员开发出了一种针对BmNPV的bacmid(杆状病毒穿梭载体)的表达系统。BmNPV bacmid可以像质粒一样在大肠杆菌E.coli中复制,并保持其对昆虫细胞的感染能力。由于这种技术大大缩短了病毒纯化和扩增的周期,从而明显减少了筛选病毒在技术上的困难和时间上的要求。重组蛋白在家蚕体内的表达水平比在其细胞系中要高出10-100倍,足以说明利用家蚕规模化生产重组蛋白非常理想,是理想的真核蛋白生物反应器。本研究通过对目前广泛应用的杆状病毒Bac-to-Bac表达系统进行改造,建立了能简便、快速获得重组杆状病毒的表达系统,并通过这一改造的系统使PRRSV ORF5、ORF6基因在家蚕细胞中获得高效融合表达,为深入研究ORF5基因的功能以及研制PRRSV的新型疫苗与诊断试剂奠定了基础。同时将ORF5、ORF6基因连接起来,从而为新的基因免疫效应的研究作出新的尝试。