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目的:通过建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,观察参麦注射液和丹红注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤模型中肾组织MDA水平、SOD活性、血清中BUN、Cr表达水平和肾组织结构病理形态改变的影响的效果对比[4]。研究参麦注射液、丹红注射液在大鼠肾缺血再灌注损伤中对肾脏的抗氧化作用及可能机制。从保护肾脏缺血再灌注损伤方面,比较参麦注射液和丹红注射液对清除自由基,减轻脂质过氧化等保护作用的对比效果,为临床药物配合应用治疗提供实验依据。 方法:建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,将40只清洁雄Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表随机分为5组,每组8只:A假手术对照组;B缺血再灌注模型对照组;C丹红注射液预处理组(活血组);D参麦注射液预处理组(益气组);E参麦+丹红注射液预处理组(益气活血组)。采取经背部双侧肋弓下缘切口,无损伤动脉夹阻断左右肾蒂的方法建立损伤模型,夹闭时间为60min,在缺血1h、再灌注1h、再灌注24h,分别对实验大鼠进行下腔静脉取血,取血量6-8m1,以3000r/min离心l0min后取上清液备检测,按MDA和SOD试剂盒使用方法检测肾组织MDA、SOD的活性及含量,按BUN和Cr试剂盒使用方法进行测定血清BUN、Cr活性及含量,光镜下观察肾组织病理损伤(HE染色切片)。用SPSS22.0统计软件对实验结果进行统计分析,将各处理组数据结果分别与假手术组及生理盐水对照组进行比较,根据比较结果确定是否存在显著性差异。 结果:1、各组大鼠血清BUN、Cr含量比较与假手术组比较,缺血再灌注组各时间点血清BUN、Cr水平均显著升高(P<0.05);与缺血再灌注比较,参麦注射液预处理组(益气组)、丹红注射液预处理组(活血组)、参麦+丹红注射液处理组(益气活血组)各时间点血清BUN、Cr水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。3个治疗组之间比较,参麦注射液处理组血清BUN、Cr水平在缺血1h、再灌注1h、再灌注24h高于丹红注射液处理组(P<0.05);参麦+丹红注射液预处理组(益气活血组)各时间点血清BUN、Cr水平均低于丹红注射液组(P<0.05);2、各组大鼠肾组织匀浆中SOD活力、MDA含量比较与假手术组比较,缺血再灌注组各时间点肾组织SOD活力均显著降低、MDA升高(P<0.01)。与缺血再灌注组比较,参麦注射液预处理组(益气组)、丹红注射液预处理组(活血组)、参麦+丹红注射液预处理组(益气活血组)各时间点肾组织SOD活力均显著升高、MDA含量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。3个治疗组之间比较,参麦注射液预处理组肾组织SOD活力均低于丹红注射液预处理组、MDA含量在各时间点高于丹红注射液预处理组(P<0.05),参麦+丹红注射液预处理组各时间点肾组织SOD活力均高于+丹红注射液预处理组(P<0.05)。参麦+丹红注射液预处理组肾组织MDA含量在缺血1h、再灌注1h均高于丹红注射液预处理组(P<0.05),在再灌注24h两者之间比较差异无统计学意义(P>0.05);3、病理切片HE染色及Paller评分光镜下右肾组织形态学变化HE染色A组大鼠肾小球、肾小管未见异常改变。B组肾小球未见异常改变,肾近球小管上皮细胞大片坏死,管腔扩张,管内可见脱落细胞碎片及蛋白样管型,上皮细胞核固缩、碎裂,胞浆空泡变性坏死,各细胞间隙变大,肾间质充血水肿及炎性细胞侵润。E组肾小球未见异常改变,肾近球小管管腔扩张,管内可见少量脱落细胞碎片,未见蛋白样管型,上皮细胞肿胀,空泡样变性,细胞间隙变大,肾间质充血水肿及少量炎性细胞浸润,D组、C组损害范围及程度较E组重,较B组明显轻。缺血再灌组肾小管Palle[5]评分显著高于假手术组(P<0.01),两组之间有极显著性差异(P<0.01),表明缺血、缺血再灌注后肾小管组织形态受损严重。参麦组、丹红组与再灌注组相比有显著性差异(P<0.05),参麦+丹红组与缺血再灌注组相比有极显著差异(P<0.01),说明联合应用两组注射液可有效的减轻肾小管组织损伤、坏死,保护肾功能。 结论:1、本实验采用新型的造模方法可以成功建立双侧肾脏缺血再灌注动物模型,保证术后大鼠在24小时内保持良好的状态,完成我们所需要的指标检测;2、通过尾静脉注射中药复方注射液丹红注射液及参麦注射液可以减轻肾缺血再灌注时造成的肾损害,尤以联合给药组效果明显,其机制可能是通过引发机体内源性保护机制,上调SOD活性,直接或间接清除氧自由基,减轻脂质过氧化,减少MDA产生,降低大鼠肾脏BUN、Cr水平。从而发挥肾脏保护作用;3、本实验结果证实缺血预处理结合缺血后适应对大鼠肾脏缺血再灌注损伤起到一定的保护作用,减轻肾脏组织结构的损伤;4、本实验结果为丹红注射液及参麦注射液的临床配伍应用提供了有利的实验基础。