【摘 要】
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鸭新城疫是由新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)引起鸭的一种急性、高度接触性、败血性传染病，可造成鸭的大量死亡，使养鸭业损失严重。加强该病的诊断方法的研究对预防和
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鸭新城疫是由新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)引起鸭的一种急性、高度接触性、败血性传染病，可造成鸭的大量死亡，使养鸭业损失严重。加强该病的诊断方法的研究对预防和控制鸭新城疫的发生，保护和促进养鸭业的健康发展具有重要意义。核衣壳蛋白（NP蛋白）是鸭新城疫病毒结构蛋白中含量最多、保守性高且具有免疫原性的一种蛋白。为此本研究构建了NP蛋白的原核表达载体并进行了诱导表达，对重组蛋白进行了免疫原性的鉴定，并以NP蛋白为免疫原，制备了NP蛋白的单克隆抗体，建立了以NP蛋白为包被抗原的间接ELISA方法，和检测抗鸭NDV的双抗体夹心ELISA方法。本研究根据GenBank发表的鸭NDVSDWF02株NP基因序列，设计并合成一对特异性引物，扩增出鸭新城疫病毒的NP基因，与原核表达载体pET-28a构建了重组质粒pET28a-NP。将测序正确的重组质粒转化至Rosetta感受态菌种，IPTG诱导后，SDS-PAGE分析表明，54KD的融合蛋白得以表达，主要以包含体形式存在。Westernblot显示，该蛋白能与鸭新城疫的阳性血清发生特异性的反应，表明具有良好的免疫原性。用纯化后的重组蛋白为包被抗原，建立检测鸭新城疫抗体的间接ELISA方法，方阵滴定试验确定最佳包被液为pH9.6的碳酸盐缓冲液，最佳包被浓度为10ng/well，血清最佳稀释度为1:1000。经应用试验表明该方法具有良好的特异性、可重复性和敏感性，为临床检测鸭新城疫抗体水平提供了一种简单、准确、快速的诊断方法。用纯化的鸭NDVNP蛋白作为免疫原，免疫6-8周龄的BALB/c小鼠，通过淋巴细胞杂交瘤技术，经以重组NP蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选，获得了2株能稳定分泌抗鸭NDVNP蛋白单抗的杂交瘤细胞株A1、B2。经ELISA检测A1、B2细胞上清效价均为为212，诱生的腹水的效价分别为107,106。Westernblot和IFA显示，只有A1株能与病毒发生特异性反应。抗鸭NDVNP蛋白单克隆抗体的成功研制，为鸭NDV的免疫学诊断及致病机理的研究奠定基础。用纯化后的腹水A1为捕获抗体，抗鸭NDV多克隆抗体为第二抗体，建立了检测鸭NDV抗原的双抗体夹心ELISA方法。方阵滴定试验确定，单抗和多抗的最佳工作浓度分别为1：1600、1:1600，最佳包被液为CB。应用试验表明该方法具有良好的特异性和重复性，为建立准确、灵敏、易于普及的鸭NDV诊断试剂盒提供了理论基础。
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摘 要： 探究性学习作为一种全新的学习方式，它的最终目的是培养学生的团队协作能力、动手动脑能力和顽强意志品质。探究性学习不仅有助于教师了解学生是否真正掌握和理解体育知识的技能技巧，还有助于了解学生在体育运动过程中，是否通过探索或者与同伴的交流协商发现并解决问题。本文对探究式学习的内涵作了初步分析，并探讨了在体育教学中如何有效开展探究式学习等问题。 关键词： 探究式学习 初中体育教学 教学运用
摘 要： 21世纪要求培养学生的创造力，在计算机教学中如何培养学生的创造力对信息技术教师提出了挑战，作者根据自身多年的高中计算机教学经验分析如何培养学生的创造力。 关键词： 创造力 创造意识 个性发展 因材施教 以提高全民族素质为宗旨，积极探索面向21世纪的基础教育的新模式是时代赋予教育的历史使命。作为提高民族素质的基础工程，实现“应试教育”向素质教育转轨、创造教育是最佳选择，也是培养创造型人
摘 要： 为适应新时期的教学需要，作者在分析当前学生基础学习需求和学习能力的基础上，提出一种引导学生自主学习、教师案例教学交叉进行的教学新方法，并结合江苏大学计算机学院原有教学大纲的实际，应用该方法连续实施两学年教学实践，通过对两批次学生的反馈及实际调查，学生的学习兴趣和实践动手能力均显著提高。 关键词： 软件体系结构 自主式学习 案例教学法 随着软件产业日益成为国民经济的重要组成部分，越来越
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摘 要： 本文分析了学校网站建设的必要性，详细介绍了基于南昌工学院特点的网站建设的过程，提出了网站测试和推广等方面的要点。 关键词： 特点 网站建设 测试 推广 现在，互联网是人们快速获取、发布和传递信息的重要渠道之一，它在人们政治、经济、生活等各个方面发挥重要作用。因此网站的地位显而易见，它已成为政府、企事业单位信息化建设中的重要组成部分，而学校网站建设也深受人们重视。 1.网站建设的必要