论文部分内容阅读
本文主要从以下几方面展开论述： 第一部分OVA诱导小鼠气道高反应性和重构平滑肌中的TRPCs表达变化及其药物干预 目的：探讨气道平滑肌TRPCs蛋白表达与小鼠气道高反应性和重构之间的关系。 方法：卵清蛋白（OVA）致敏建立昆明小鼠哮喘模型；肺组织HE染色，气道平滑肌组织Masson染色和羟脯氨酸含量测定，离体气管环张力实验等评价气道重构和气道高反应性；Western blot检测气道平滑肌组织TRPC1,3,6,7蛋白表达。 结果：①OVA诱导小鼠在激发阶段出现呼吸加深加快，口唇发绀，点头呼吸等哮喘急性发作表现。②与对照组相比，哮喘组小鼠气道周围炎细胞浸润，气道壁明显增厚，气道平滑肌周围胶原沉积，气道平滑肌组织羟脯氨酸含量明显增加；哮喘组小鼠离体气管环对乙酰胆碱（ACh）的反应显著增加。③小鼠气道平滑肌组织TRPC1,3,6,7蛋白均有表达，与对照组相比，哮喘组小鼠气道平滑肌组织TRPC3蛋白表达明显增加；④TRPC阻断剂GdCl3可明显抑制ACh引起的气道平滑肌组织收缩；⑤氨茶碱（100μM）和异莲心碱（50μM）可明显抑制ACh引起的离体气道平滑肌收缩，地塞米松（1μM）此作用不明显；⑥地塞米松（3mg/kg）和异莲心碱（3mg/kg）连续给药五天可明显降低哮喘小鼠气道平滑肌组织羟脯氨酸含量，氨茶碱（20mg/kg）此作用不明显；⑦地塞米松，异莲心碱和氨茶碱连续给药五天均不影响哮喘小鼠气道平滑肌组织TRPC3蛋白表达。 第二部分增殖气道平滑肌细胞中的TRPC3表达变化 目的：探讨TRPC3蛋白在增殖气道平滑肌细胞中的表达变化。 方法：酶解法分离气道平滑肌细胞用于原代培养；MTT法检测气道平滑肌细胞增殖程度；Western blot检测气道平滑肌细胞TRPC3蛋白表达。 结果：10％FBS明显刺激气道平滑肌细胞增殖并且明显增加TRPC3蛋白表达，3μM GdCl3能明显抑制气道平滑肌细胞增殖。 结论：TRPC3蛋白表达增加参与哮喘小鼠气道平滑肌高反应性和重构，有可能是哮喘发病机制研究的新方向和药物治疗干预的新靶点。