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目的：通过比较细胞CHO—EPO在含有不同成分的的无血清培养基中的生长状况及重组人促红细胞生成素(rhEPO)的表达量，建立一个适合规模化生产的分泌重组促红细胞生成素的CHO细胞的培养条件，提高细胞培养液中rhEPO蛋白的糖基化水平和表达量。
方法：用稳定转染了rhEPO基因的CHO细胞作为实验细胞株，以JRH公司生产的无血清培养基EX—CELLTM—302 CHO SERUM—FREE MEDIUM为基础培养基，在其中添加柠檬酸铁、转铁蛋白、胰岛素等多种成分，考察对细胞生长状态和rhEPO蛋白表达量的影响，进而确定无血清培养基的添加组分；提高细胞密度，延长细胞存活周期，提高rhEPO蛋白糖基化程度及蛋白表达量；优化生物反应器工艺参数使细胞存活周期达到50天左右，提高反应器单批产量。
结果：通过对分泌重组促红细胞生成素的CHO细胞培养条件的优化，提高了rhEPO表达量和糖基化程度，rhEPO唾液酸含量大于10mmol/molEPO以上，等电点为3.75—4.25，相对分子量为37000～40000左右，比活(包括体内、体外)为1.8×105IU/mg以上，活性回收率为40％，纯度达到99％以上，反应器单批产量4.5gEPO蛋白。
结论：利用所述方法可以快速优化培养基成分，显著提高细胞CHO—EPO的蛋白表达量，适合大规模生产。