论文部分内容阅读
苎麻(Boehmeria nive(L.)Guad.)是荨麻科苎麻属宿根型草本植物，属我国特产，是重要的纺织纤维和饲料作物。由于苎麻为杂合体，其遗传背景十分复杂，有性杂交等常规方法难以取得育种上的突破，因此，探讨利用基因工程技术改良苎麻品种具有重要意义。本研究以苎麻“SS370”、“湘苎5号”、“GS13-X1”和“GS13-X2”田间取来的嫩茎及由“GS13-X1”和“GS13-X2”的种子萌发而来的子叶和下胚轴为外植体，选用MS培养基为基本培养基，附加激素6-BA、IAA、2，4-D、IBA和NAA，通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响，不同激素配比对生根的作用，以及苎麻外植体对抗生素的本底抗性，建立了苎麻遗传转化再生体系，为进一步利用基因工程技术对苎麻进行遗传改良打下了技术基础。主要研究内容和结果如下:
1.本研究对不同消毒时间的消毒效果进行了比较，发现先用75％酒精处理30秒1分钟，再用0.1％的HgCl2处理6～8分钟灭菌效果较好。
2.“SS370”、“湘苎5号”、“GS13-X1”、“GS13-X2”嫩茎段最适诱导愈伤培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+2，4-D0.5mg/L+LH500 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.5g/L。“GS13-X1”子叶及下胚轴的最适诱导愈伤培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.2 mg/L+LH500 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.5g/L;“GS13-X2”子叶及下胚轴最适诱导愈伤培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+2，4-D0.5 mg/L+LH500 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.5g/L。
3.“GS13-X1”和“GS13-X2”的最适分化培养基均为MS+6-BA2.0mg/L+2，4-D0.3mg/L+蔗糖25g/L+琼脂7.5g/L;“湘苎5号”最适分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+0.2 mg/L IAA+蔗糖25g/L+琼脂7.5g/L;“SS370”愈伤组织未分化出苗。
4.四个品种腋芽直接出芽的最适合培养基均为MS+6-BA2mg/L+CH300g/L。
5.“GS13-X1”、“GS13-X2”和“湘苎5号”小苗的最适生根培养均为MS+NAA0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L。
6.在“GS13-X2”抗生素浓度梯度筛选实验中获得50mg/L卡那霉素可以抑制不定芽的分化;40mg/L卡那霉素可以抑制再生植株的生根。