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本试验以探讨串珠镰刀菌素(MON)对仔猪免疫功能影响为研究目的。选用玉米粉作为串珠镰刀菌的产毒培养基,将菌株接种于培养基后,经过25℃10d、4℃7d、25℃ 10d的产毒培养,115℃, 15分钟对产毒培养基高压灭菌,将得到的培养物置于60℃烘干后粉碎。为检测培养物中是否含有MON,采用乙腈-水(95:5)溶液从培养物中抽提MON;另外用7个不同浓度MON标准液制备标准曲线;同时测定3个不同已知浓度的MON标准液的峰面积值求出回收率。经高效液相色谱法检测结果表明:提取液的出峰时间为12.84min,与MON标准液的出峰时间12.80min相一致。7个不同浓度的标准液制备的标准曲线有良好的线性关系,回收率为81.02%。
将串珠镰刀菌接种于玉米粉产毒培养基进行大量产毒培养,共提取培养产物90公斤,收集提取液4.5L,同时采用高效液相色谱法检测提取液中MON含量。检测结果表明:提取液中MON含量为0.9822mg/mL。用制备的MON提取液进行动物毒性试验。选用12头40日龄三元杂仔猪,平均初体重为12kg±0.5kg,随机分成两组,每组6头,雌雄各半。对照组喂饲仔猪全价饲料,试验组喂饲每千克饲料添加30mgMON的仔猪全价饲料。试验期为28天,每周清晨定期空腹前腔静脉抽血一次。试验期间观察仔猪临床表现,检测血液中T淋巴细胞ANAE阳性率,T淋巴细胞转化能力,白介素-2、白介素-6、肿瘤坏死因子-α、免疫球蛋白Ig-G含量,猪瘟抗体水平。试验结束后扑杀试验仔猪,观察病理变化和进行病理组织学检查。结果发现:①试验期间试验组仔猪出现精神沉郁,条件反射能力差等临床症状。②剖检发现部分仔猪出现心脏粘连,肠道充血。病理组织学观察发现肝细胞出现空泡变性,淋巴细胞浸润;淋巴结出现淋巴小梁离散;肾间质出现结缔组织增生,淋巴细胞浸润,肾组织出现轻微出血,肾小管堵塞,肾上皮细胞变性;胃组织出现淋巴细胞浸润;心肌出血,淋巴细胞浸润。③血液中T淋巴细胞数量减少、T淋巴细胞转化率降低,血清中IL-6、TNF-α含量发生改变,IL-2,Ig-G以及猪瘟抗体含量均降低。
本试验结果证实MON可对仔猪机体造成损害,降低仔猪免疫功能,影响疫苗的保护能力,增加对疾病的易感性。本研究可为防治畜禽疾病提供一定的理论依据。