论文部分内容阅读
研究目的:
探究CD200-CD200R1信号在自发性脑出血中发生的变化及其起到的作用,尤其是这一信号与血脑屏障的关系,以及通过给予CD200Fc药物的方式进行干预,研究这一信号对于神经功能预后的作用。
研究方法:
采用尾动脉采血,自体血注射法来构建小鼠脑出血模型,所有小鼠品系均为C57/BL6,体重20至24克。在建模后6小时、12小时、24小时、72小时取脑组织,用蛋白质印记法(Western Blot)测出不同时间点CD200R和CD200的表达量的变化。选择它们改变最显著的时间点作为后续实验选择的关键时间点。在脑出血建模后关键时间点,用免疫荧光法对CD200R分别与小胶质细胞、神经元、星形胶质细胞的标记物进行共定位,以验证在脑出血后CD200R的表达部位和其起作用的细胞。在干预实验中,将小鼠随机分成对照组、脑出血组、CD200Fc治疗组、普通IgG对照组,在建模后1小时按每克体重0.08微克的剂量给药。在建模后第24小时用依文思蓝法测各组小鼠血脑屏障的渗漏程度。此外,按以上四个分组建模和给药后,在建模后第24小时测各组小鼠的加西亚评分,连续一周测量各组小鼠的各项长期行为学,包括失足率、转角试验、疲劳棒试验。所有数据采用GraphPad Prism v.6.02进行统计分析,并且用均数土标准差(mean±SD)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多重比较用Tukey。P<0.05为差异有统计学意义。
研究结果:
(1)小鼠脑出血后脑内CD200R1表达量减少,在24小时降到最低并且在72小时回升;CD200表达量在24小时明显降低;(2)小鼠脑内CD200R1主要表达在小胶质细胞上,而星形胶质细胞和神经元上几乎没有表达;(3)脑出血后给予CD200Fc能在24小时之时检测到对小鼠血脑屏障的保护;(4)脑出血后给予CD200Fc能在短期和长期均显示出对小鼠的神经功能学改善。
研究结论:
小鼠脑内CD200R主要表达在小胶质细胞上,并且在脑出血后其表达量减少,至24小时达到最低,脑出血后一小时给予CD200Fc治疗可以减轻第24小时的血脑屏障渗漏,并对近、远期神经功能学产生改善作用。
探究CD200-CD200R1信号在自发性脑出血中发生的变化及其起到的作用,尤其是这一信号与血脑屏障的关系,以及通过给予CD200Fc药物的方式进行干预,研究这一信号对于神经功能预后的作用。
研究方法:
采用尾动脉采血,自体血注射法来构建小鼠脑出血模型,所有小鼠品系均为C57/BL6,体重20至24克。在建模后6小时、12小时、24小时、72小时取脑组织,用蛋白质印记法(Western Blot)测出不同时间点CD200R和CD200的表达量的变化。选择它们改变最显著的时间点作为后续实验选择的关键时间点。在脑出血建模后关键时间点,用免疫荧光法对CD200R分别与小胶质细胞、神经元、星形胶质细胞的标记物进行共定位,以验证在脑出血后CD200R的表达部位和其起作用的细胞。在干预实验中,将小鼠随机分成对照组、脑出血组、CD200Fc治疗组、普通IgG对照组,在建模后1小时按每克体重0.08微克的剂量给药。在建模后第24小时用依文思蓝法测各组小鼠血脑屏障的渗漏程度。此外,按以上四个分组建模和给药后,在建模后第24小时测各组小鼠的加西亚评分,连续一周测量各组小鼠的各项长期行为学,包括失足率、转角试验、疲劳棒试验。所有数据采用GraphPad Prism v.6.02进行统计分析,并且用均数土标准差(mean±SD)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多重比较用Tukey。P<0.05为差异有统计学意义。
研究结果:
(1)小鼠脑出血后脑内CD200R1表达量减少,在24小时降到最低并且在72小时回升;CD200表达量在24小时明显降低;(2)小鼠脑内CD200R1主要表达在小胶质细胞上,而星形胶质细胞和神经元上几乎没有表达;(3)脑出血后给予CD200Fc能在24小时之时检测到对小鼠血脑屏障的保护;(4)脑出血后给予CD200Fc能在短期和长期均显示出对小鼠的神经功能学改善。
研究结论:
小鼠脑内CD200R主要表达在小胶质细胞上,并且在脑出血后其表达量减少,至24小时达到最低,脑出血后一小时给予CD200Fc治疗可以减轻第24小时的血脑屏障渗漏,并对近、远期神经功能学产生改善作用。