【摘 要】
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构建了含高赖氨酸蛋白质基因cDNA及潮霉素磷酸转移酶基因的表达载体p19ZKH (19Z启动子) .用基因枪轰击法将p19ZKH及另一表达载体p35SKH(35S启动子)导入玉米幼胚及幼胚 诱导的
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构建了含高赖氨酸蛋白质基因cDNA及潮霉素磷酸转移酶基因的表达载体p19ZKH (19Z启动子) .用基因枪轰击法将p19ZKH及另一表达载体p35SKH(35S启动子)导入玉米幼胚及幼胚 诱导的愈伤组织.经Southern杂交分析,外源基因以1~4个拷贝的形式插入玉米基因组中;外源基因能遗传至R<,1>、R<,2>代,但外源基因在后代发生分离,未得到纯合的转基因植株.Northern杂交分析检测转基因植株中外源基因SB401mRNA的积累情况.Western杂交分析R<,1>代成熟种子中蛋白的积累情况,结果表明,SB401蛋白得到了表达,但大小发生了变化,以50KD及25KD两种大小存在.对20株R<,1>代转基因植株成熟种子进行赖氨酸含量测定,发 现有6株种子干重中赖氨酸含量提高10﹪以上.利用R-PCR的方法得到了转基因植株Al-Z55外源基因插入位置3′端的边界序列,通过Southern杂交初步鉴定PCR产物中包括nos片段、载 体片段或基因组片段.
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