【摘 要】
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本文以Survivin为肺癌分子靶标，应用DNA甲基化基因沉默技术设计寡核苷酸药物SurKex，选择性抑制NCI-H460细胞中survivin基因的表达，且特异性诱导了survivin启动子的甲基化，再次验
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本文以Survivin为肺癌分子靶标，应用DNA甲基化基因沉默技术设计寡核苷酸药物SurKex，选择性抑制NCI-H460细胞中survivin基因的表达，且特异性诱导了survivin启动子的甲基化，再次验证了DNA甲基化沉默基因的理论，且为表观遗传领域的研究提供了研究工具，也为肿瘤药物的设计提供了新的思路。
首先，通过RT-PCR方法，验证了survivin基因在NCI-H460细胞株中过量表达。
其次，将SurKex转染NCI-H460细胞，并抽提RNA，通过半定量RT-PCR方法，初步确定Surkex对survivin mRNA的影响。结果显示： Surkex抑制了survivin mRNA的表达，且浓度越高抑制越明显，5uM比2.5uM浓度的Sukex抑制更明显。
最后，将5uM浓度的Surkex转染NCI-H460细胞，并抽基因组DNA，通过Bisulfite sequencing方法考察survivin启动子位点的甲基化情况，实验中以Lipofectamine转染试剂和随机寡核苷酸序列Random作对照，结果显示：与对照组相比，Surkex明显特异性的诱导了survivin启动子中的一CpG位点C的甲基化，Random虽也为寡核苷酸且组成与Surkex类似，但不能诱导甲基化。
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