水溶性槲皮素-7-硫酸酯钠体外抗氧化活性的研究及其与DNA相互作用的探究

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[目的]  槲皮素-7-硫酸酯钠是新近人工半合成的槲皮素水溶性衍生物,有关其药理活性报道较少。本文初步研究槲皮素-7-硫酸酯钠的电化学行为、体外抗氧化活性及对DNA氧化损伤的保护作用,为其将来临床药用提供理论依据。  [方法]  1.采用循环伏安法(CV)、微分脉冲伏安法(DPV)等方法测试了槲皮素-7-硫酸酯钠在玻碳电极(GCE)上的电化学行为,探讨了它的电化学反应过程机理。  2.通过电化学试验、DPPH自由基清除实验、清除羟自由基(OH·)实验、抑制邻苯三酚自氧化实验及抑制小牛胸腺DNA损伤实验,评价槲皮素-7-硫酸酯钠体外抗氧化性能。  3.采用紫外扫描法、凝胶电泳技术、电化学方法研究了槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA的相互作用,探究与DNA的作用机理。  [结果]  1.槲皮素-7-硫酸酯钠在乙醇-水-B-R缓冲液体系中,在玻碳电极表面有较强的吸附,峰电流敏感,氧化还原可逆性较好。槲皮素-7-硫酸酯钠主氧化峰电流与浓度存在良好的线性关系。  2.电化学实验、自由基清除实验及抑制DNA损伤实验均显示槲皮素-7-硫酸酯钠有很强的抗氧化能力。电氧化能力较槲皮素低,但是清除自由基及抑制DNA氧化损伤的能力较槲皮素强。在实验浓度内,其抗氧化能力随着槲皮素-7-硫酸酯钠浓度的增大而增强,呈明显的量效关系。  3.槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA相互作用后,紫外扫描实验结果显示紫外吸收峰没有发生偏移,吸光度等于槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA的吸光度的叠加,没有新的吸收峰形成;凝胶电泳实验显示槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA相互作用后DNA条带变亮,DNA浓度及纯度均没有明显变化;电化学试验显示,加入DNA后槲皮素-7-硫酸酯钠的还原峰电流下降,峰电位负移。槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA的结合数及结合常数在不同pH溶液中各不相同。  [结论]  1.槲皮素-7-硫酸酯钠B环的两个供电子羟基通过两电子两质子参与可逆的氧化反应,生成对应的邻醌。其电氧化机理与槲皮素类似,但是其电氧化还原能力不及槲皮素。  2.槲皮素-7-硫酸酯钠体外抗氧化能力明显优于抗坏血酸和槲皮素,有期望作为槲皮素的前药促进槲皮素的临床应用。  3.槲皮素及槲皮素-7-硫酸酯钠与DNA的结合数及结合常数均与溶液pH变化有密切的关系。同时证明它们与DNA均发生静电作用,没有新的化学键形成。
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